比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究芪參益氣方有效組分的配伍機(jī)制.pdf

1、芪參益氣方由黃芪、丹參、三七和降香四味中藥組成，主要用于治療氣虛血瘀型冠心病。該方臨床療效確切，四味藥暗合方劑“君臣佐使”配伍規(guī)律，但其作用機(jī)理尚不甚明晰。本文以蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)為主要研究手段，分別從整體動(dòng)物水平和細(xì)胞水平探討芪參益氣方有效組分的配伍機(jī)制。
　　 本文首先應(yīng)用雙向電泳結(jié)合激光解析飛行時(shí)間質(zhì)譜的分析方法，分析了芪參益氣方給藥對(duì)大鼠心肌組織蛋白質(zhì)組的影響，闡述了該方改善能量代謝、保護(hù)受損細(xì)胞等作用的分子機(jī)制。通過比較蛋

2、白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)全方及各有效組分(黃芪皂苷、丹參酚酸類成分、三七總皂苷和降香揮發(fā)油)單獨(dú)給藥情況下的蛋白質(zhì)組改變進(jìn)行分析，提出了貢獻(xiàn)指數(shù)(Contribution Index)用于評(píng)判各組分在不同作用途徑上對(duì)全方藥效的貢獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)黃芪和三七表現(xiàn)出主要的恢復(fù)能量代謝和線粒體呼吸鏈功能作用，而丹參則通過改善氧化應(yīng)激產(chǎn)生心肌保護(hù)作用，四個(gè)組分均在保護(hù)細(xì)胞完整結(jié)構(gòu)方面有良好表現(xiàn)，基本揭示了芪參益氣方有效組分配伍抗心肌缺血的作用機(jī)制，為從分子水平詮釋

3、方劑“君”、“臣”、“佐”、“使”配伍理論的現(xiàn)代生物學(xué)意義提供了新方法。
　　 其次本文通過雙向電泳分析條件優(yōu)化，建立人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞蛋白質(zhì)組分析方法，并將其應(yīng)用于芪參益氣方促進(jìn)入臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究。該部分實(shí)驗(yàn)從蛋白質(zhì)水平上初步解釋了芪參益氣方與增殖相關(guān)的作用機(jī)理，并且通過對(duì)有效組分單獨(dú)作用的蛋白質(zhì)組分析，初步發(fā)現(xiàn)了芪參益氣方的作用主要與黃芪降低能量消耗，黃芪、三七、降香促進(jìn)血管生成，以及丹參的抗氧化、抗粘附