絞股藍(lán)總皂甙對(duì)阿霉素致大鼠膈肌毒性的保護(hù)作用.pdf

1、目的：研究阿霉素（adriamycin, ADM)對(duì)大鼠膈肌的毒性作用及機(jī)制；探討絞股藍(lán)總皂甙（gypenosides, GP）對(duì)阿霉素致大鼠膈肌毒性的保護(hù)作用。
　　方法：成年雄性Sprague-Dawley大鼠32只，隨機(jī)分成4組，對(duì)照組（CON）,阿霉素組(ADM),阿霉素組+絞股藍(lán)總皂甙低劑量組(ADM+L-GP）,阿霉素組+絞股藍(lán)總皂甙高劑量組（ADM+H-GP），每組8只。除CON組外，其余各組給予阿霉素2.0mg·k

2、g-1腹腔注射，隔日1次，共6次，累計(jì)量達(dá)12mg·kg-1,復(fù)制阿霉素毒性的動(dòng)物模型。CON組腹腔注射等量的生理鹽水。ADM+L-GP組和ADM+H-GP分別給予絞股藍(lán)總皂甙250mg·kg-1·d-1、500 mg·kg-1·d-1，灌胃，給藥容量為10ml·kg-1，連續(xù)4周, CON組和ADM組給予等量的純凈水。應(yīng)用體外灌流大鼠膈肌條的方法，分別測(cè)量其單收縮張力(Pt)、最大強(qiáng)直張力(Po)、峰值收縮時(shí)間(CT)、半舒張時(shí)間(1

3、/2RT)、張力最大上升速率(+dT/dtmax）、張力最大下降速率(-dT/dtmax)、張力-頻率曲線(Force-frequence curve)及疲勞指數(shù)(FI)的變化；同時(shí)測(cè)定膈肌組織超氧化物歧化酶（SOD)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、乳酸脫氫酶(LDH)、總一氧化氮合酶(con-NOS)和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）、Na+-K+-ATP酶、 Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性及丙二醛(MDA)含量；電鏡觀察膈肌組織超微結(jié)構(gòu)

4、的變化；流式細(xì)胞儀測(cè)定膈肌細(xì)胞凋亡率的變化。
　　結(jié)果：1.大鼠體重和膈肌/體重比：ADM組、ADM+L-GP組和ADM+H-GP組大鼠明顯低于CON組(P﹤0.01)；ADM+L-GP組和ADM+H-GP組大鼠明顯高于ADM組（P﹤0.01,P﹤0.05）。2.大鼠膈肌的各項(xiàng)力學(xué)指標(biāo)：?jiǎn)问湛s張力、最大強(qiáng)直張力、張力最大上升速率、張力最大下降速率與疲勞指數(shù)，ADM組明顯低于CON組（P﹤0.01）,ADM+L-GP組和ADM+H-

5、GP組均高于ADM組（P﹤0.05,P﹤0.01）；單收縮的峰值收縮時(shí)間和半舒張時(shí)間， ADM組與CON組相比明顯延長(zhǎng)（P﹤0.01）， ADM+L-GP組和ADM+H-GP組與CON組均無(wú)差別。3.給予10、20、40、60、100 Hz頻率的方波電壓刺激膈肌條，ADM組、ADM+L-GP組和ADM+H-GP組的張力明顯低于CON組，ADM+L-GP組和ADM+H-GP組較ADM組增大（P﹤0.05,P﹤0.01）。4.大鼠膈肌組織的

6、SOD、LDH、SDH、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性ADM組明顯低于CON組(P﹤0.01)，ADM+L-GP組和ADM+H-GP組均高于ADM組（P﹤0.05,P﹤0.01）；MDA含量、con-NOS和iNOS活性ADM組明顯高于CON組(P﹤0.01)， ADM+L-GP組和ADM+H-GP組均低于ADM組(P﹤0.01)。5.透射電子顯微鏡顯示膈肌超微結(jié)構(gòu)：ADM組大鼠膈肌肌絲紊亂、斷裂，Z線不清或消

7、失；線粒體數(shù)量減少，水腫擴(kuò)張，嵴模糊斷裂，大量線粒體空泡化或囊泡化，有髓板樣物形成；肌漿網(wǎng)明顯擴(kuò)張。電鏡顯示絞股藍(lán)總皂甙可減輕阿霉素導(dǎo)致的膈肌組織超微結(jié)構(gòu)的病理改變。6.流式細(xì)胞儀測(cè)定膈肌細(xì)胞凋亡率變化顯示：ADM組膈肌細(xì)胞凋亡率（32.23±0.95）％明顯高于CON組（1.14±0.14）％(P﹤0.01)， ADM+L-GP組（20.98±1.28）％和ADM+H-GP組（13.13±0.52）％膈肌細(xì)胞凋亡率明顯低于ADM組(P

8、﹤0.01)，但仍然高于CON組(P﹤0.01)。
　　結(jié)論：阿霉素?fù)p傷大鼠膈肌，導(dǎo)致膈肌收縮和舒張功能下降，其機(jī)理與阿霉素導(dǎo)致膈肌抗氧化酶活性降低，自由基生成增多，脂質(zhì)過(guò)氧化增加，線粒體損傷和功能障礙及其酶活性降低，NOS、iNOS活性增強(qiáng)而催化生成NO的毒性作用及細(xì)胞凋亡增加有關(guān)。絞股藍(lán)總皂甙具有抗氧化應(yīng)激作用、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，減輕膈肌細(xì)胞線粒體損傷作用，保護(hù)SDH、LDH、ATP酶活性，抑制NOS、iNOS活性，降低細(xì)胞凋亡