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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文肺癌活檢標(biāo)本中K16mRNA表達水平的研究姓名:余碧蕓申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(xué)(呼吸病學(xué))指導(dǎo)教師:應(yīng)可凈20040401浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文角蛋白家族中另一成員K16(keratin16)一直以來被認(rèn)為是增殖的標(biāo)志,在皮膚病領(lǐng)域的扁平苔蘚和銀屑病中表達較高,而在腫瘤領(lǐng)域研究甚少。而浙江大學(xué)腫瘤研究所丁佳逸教授在基因芯片篩查中發(fā)現(xiàn)K16在肺癌組織中表達較高,在肺癌組織的濃度是癌旁正常組織濃度的13,8倍,比K1
2、9(6倍)更高。為了迸一步揭示K16與肺癌的關(guān)系,本實驗應(yīng)用熒光定量PCR(fluorescencequantitativePCR,F(xiàn)QPCR)的方法檢測纖支鏡活檢肺癌組織和良性病變組織K16mRNA水平的表達,從而確定K16mRNA在肺癌組織和良性病變組織中表達水平有無差異,探討其能否成為一種新的腫瘤標(biāo)記物。對象和方法于2003年l1月~2004年2月在浙江大學(xué)附屬邵逸夫醫(yī)院收集到纖支鏡活檢標(biāo)本36例。其中肺癌組26例,包括鱗癌17例
3、,腺癌7例,小細(xì)胞肺癌2例,肺良性病變組10例,包括結(jié)核7例,炎癥3例。應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)進行K16mRNA的表達的檢測,得到相應(yīng)的ct值。FQPCR定量分析根據(jù)目的片段K16Ct值,內(nèi)參照GAPDHCt值=K16精確定量。結(jié)果普通PCR檢測結(jié)構(gòu):肺癌組織和良性病變組織的K16經(jīng)過35個PCR循環(huán)均有擴增條帶,但顏色均較淺,而空白對照則無明顯條帶。說明K16在兩者中均有較低的表達。FQPCR檢測結(jié)果:取K16Ct值/GAPDHCt值
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