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文檔簡介
1、目的:
研究仔鼠巨細(xì)胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)顱內(nèi)感染對海馬局部Ca2+與蛋白激酶C(PKC)表達(dá)水平的影響。
方法:
體外細(xì)胞培養(yǎng)法制備MCMV Smith株,細(xì)胞病變法(CPE)測定病毒致半數(shù)細(xì)胞感染量(TCID50)。ELISA法篩選MCMV IgM、IgG均陰性的BABL/C小鼠,雌雄小鼠交配受孕,待分娩后隨機(jī)選擇乳鼠分為病毒組和對照組,于生后24小
2、時內(nèi)分別顱內(nèi)注射病毒懸液10微升和等量無菌生理鹽水。觀察各組幼鼠的生存發(fā)育情況,待14d后各取兩組10只仔鼠,無菌采集仔鼠腦組織,采用PCR法檢測有無MCMV感染。
其余仔鼠待其70d后無菌采集海馬組織,應(yīng)用免疫組化技術(shù)及熒光分光光度計法分別檢測PKC蛋白及Ca2+濃度的表達(dá),并用光學(xué)顯微鏡觀察海馬組織的病理學(xué)改變。
結(jié)果:
1.病毒組和對照組仔鼠腦組織感染率分別為90[%]及0[%],x2=1
3、6.36,P<0.05;病毒組與對照組成活率分別為28.17[%]及100[%],x2=0.003,P<0.05。
2.病毒組和對照組海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)的Ca2+濃度分別為221.48±21.36及118.75±40.85,t=10.957,P<0.05。
3.病毒組和對照組蛋白質(zhì)表達(dá)水平分別為0.12±0.02及0.14±0.03,t=2.766,P<0.05。
4.海馬病理學(xué)組織切片可見病毒組
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