熒光原位雜交技術在嗜酸粒細胞增多疾病及骨髓增生異常綜合征中診斷作用的研究.pdf

1、第一部分：
　　 嗜酸粒細胞增多疾病的細胞遺傳學和分子生物學特征的研究
　　 研究目的：
　　 本研究旨在探討嗜酸粒細胞增多疾病患者的細胞遺傳學和分子生物學特征。
　　 研究方法：
　　 通過間期熒光原位雜交(FISH)和逆轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)的方法對79例嗜酸粒細胞增多（嗜酸粒細胞計數(shù)≥1.5×109/L）患者的血小板衍生生長因子受體(PDGFR)A、PDGFRB和纖維母細胞生長因

2、子受體(FGFR)1基因重排進行檢測，并對44例患者的T細胞受體(TCR)基因重排進行了檢測。
　　 結果：
　　 79例患者中檢出FIP1L1/PDGFRA(F/P)融合基因陽性19例，檢出CHIC2缺失19例，檢出PDGFRB基因重排4例，未檢測到FGFR1基因重排患者。按照2008年WHO分類修訂診斷后，有42％(20/48)的高嗜酸粒細胞綜合征(HES)和83%(5/6)的慢性嗜酸粒細胞白血病(CEL)患者更正診

3、斷為伴PDGFRA/B重排的髓系腫瘤，17%(1/6)的CEL更正診斷為慢性嗜酸粒細胞白血病，非特指型(CEL-NOS)。染色體核型分析檢出克隆性細胞遺傳學異常4例，1例為CEL-NOS,3例為伴PDGFRB重排的髓系腫瘤，所有21例伴PDGFRA重排的患者均未檢測出4q12異常。伴PDGFRA／B重排的髓系腫瘤、HES和繼發(fā)性嗜酸粒細胞增多三組患者的克隆性TCR基因重排檢出率分別為33%(5/15)、40%(6/15)和36%(5/1

4、4)，三組間無明顯差異。
　　 結論：
　　 在既往診斷HES和CEL的患者中存在較高比例的PDGFRA/B基因重排，通過間期FISH和PCR方法可以提高伴PDGFRA/B重排的髓系腫瘤的診斷。
　　 第二部分：
　　 高嗜酸粒細胞綜合征及伴血小板衍生生長因子受體重排的髓系腫瘤患者的臨床特征及療效分析
　　 研究目的：
　　 分析HES和伴PDGFR重排的髓系腫瘤的臨床特征以及療效。

5、>　　 研究方法：
　　 我們分析了2005年9月至2011年3月就診我院的84例嗜酸粒細胞增多患者的臨床特征及治療反應，其中包括了45例HES患者和39例伴PDGFR重排的髓系腫瘤患者。
　　 結果：
　　 我們對HES和伴PDGFR重排的髓系腫瘤患者的臨床特征進行了比較，伴PDGFR重排患者的血紅蛋白水平和血小板計數(shù)明顯低于HES患者，而肝脾腫大和骨髓纖維化的發(fā)生率及血清維生素B12水平均明顯高于HES患者

6、。糖皮質激素治療45例HES患者，誘導治療中位劑量為潑尼松30mg／日，維持治療的中位劑量為潑尼松10mg／日，中位隨訪13個月，治療總有效率為91%。19例F/P融合基因陽性患者接受了伊瑪替尼治療，用藥后中位隨訪23個月，90%(17/19)達到了完全血液學緩解(CHR)，獲得CHR的中位時間為2周，92%(12/13)達到了完全分子學緩解(CMR)，獲得CMR的中位時間為4個月。7例患者應用維持量大于100mg/周，中位隨訪23個月

7、內(nèi)未發(fā)現(xiàn)分子學復發(fā)，中位CMR持續(xù)時間為18個月。4例停藥患者全部出現(xiàn)血液學復發(fā)，最長的復發(fā)時間是停藥后50個月。
　　 結論：
　　 伴PDGFR重排的髓系腫瘤是一組有明顯骨髓增殖性腫瘤(MPN)特點的疾病。伊瑪替尼治療劑量100mg／日可以有效的誘導F/P融合基因陽性患者緩解，100mg／周也可以維持疾病長期緩解。
　　 第三部分：
　　 FISH在骨髓增生異常綜合征細胞遺傳學評估中作用的研究

8、　　 研究目的：
　　 研究骨髓及外周血FISH檢測在骨髓增生異常綜合征(MDS)細胞遺傳學評估中的作用。
　　 研究方法：
　　 前瞻性對比了112例初診MDS患者的常規(guī)染色體核型分析和骨髓FISH檢測結果，同時對56例患者骨髓及外周血FISH結果進行了比較。
　　 結果：
　　 在41例檢出克隆性異常核型的病例中，有22例骨髓FISH檢測與核型分析結果不完全一致，16例是由于探針組合不能覆蓋

9、異常染色體區(qū)段所致，而涉及到探針檢測位點的不同僅有6例，F(xiàn)ISH檢測結果并未改變這6例患者的細胞遺傳學預后分組。在71例未檢出克隆性異常核型的病例中，15例(21%)通過骨髓FISH檢出異常，在＜20個分裂相和≥20個分裂相的病例中FISH異常檢出率分別為27%(14/51)和5%(1/20)。72%(21/29)的骨髓FISH異常病例同時檢出外周血異常,4%(1/27)的骨髓FISH結果正常病例外周血檢出異常。
　　 結論：<