組織激肽釋放酶8在宮內生長受限大鼠海馬中的表達及其意義.pdf

1、目的：用孕期全程低蛋白(6％)飲食法制造宮內生長受限(Intrauterine growth retardation，IUGR)仔鼠腦損傷模型，觀察組織激肽釋放酶8(Neuropsin，KLK8)在海馬中的表達變化，檢測仔鼠學習記憶能力，探討IUGR發(fā)生腦損傷的機制。
　　 方法：選取健康三月齡Sprague-Dawley大鼠28只，按照雌雄1∶1的比例置于同一籠中交配。受孕成功的孕鼠隨機分為對照組和IUGR組。對照組母鼠自受孕

2、后第一天開始給予21%正常蛋白飲食，而IUGR組母鼠自受孕后第一天開始給予6%低蛋白飲食，建立IUGR仔鼠模型。兩組仔鼠生后至21日的哺乳期內，均給予母鼠21%正常蛋白飲食喂養(yǎng)、自由飲水。21日后將母鼠與仔鼠分籠，給予兩組仔鼠21%正常蛋白飲食喂養(yǎng)、自由飲水，喂養(yǎng)至32日。選擇1日、5日、10日和21日作為觀察的4個時間點，每個時間點每組有6只仔鼠，測量仔鼠體重、頭臀長、腦濕重，并對各個時間點仔鼠留取海馬組織，HE染色觀察1日及21日海

3、馬結構的變化，用Western blot檢測海馬組織中組織激肽釋放酶8的表達，于26日至32日行Morris水迷宮測試，檢測仔鼠學習記憶能力。
　　 結果：1、兩組仔鼠體格生長及腦重的動態(tài)比較：與對照組相比，1日齡IUGR仔鼠形態(tài)瘦小，體重、頭臀長及腦濕重均降低(P＜0.05)；5日齡及10日齡時體重、頭臀長及腦濕重仍落后(P＜0.05)；經追趕生長，到21日齡時，體重、頭臀長無明顯差異(P＞0.05)，腦濕重仍低(P＜0.05

4、)。
　　 2、兩組仔鼠海馬HE染色的變化：與對照組相比，1日齡時IUGR仔鼠海馬神經元細胞排列疏松、紊亂，細胞數目減少；部分細胞水腫明顯，出現空泡；核固縮細胞比較多，出現凋亡細胞。21日齡時IUGR組神經元細胞水腫基本消失，但細胞排列仍相對疏松、紊亂，細胞數目未見明顯增多。
　　 3、兩組仔鼠海馬中組織激肽釋放酶8的表達：在四個時間點，1日齡時兩組仔鼠組織激肽釋放酶8的表達低,5日齡時兩組仔鼠組織激肽釋放酶8的表達增加

5、，10日齡和21日齡時兩組仔鼠組織激肽釋放酶8的表達急劇增加；與對照組相比，在四個時間點，IUGR仔鼠組織激肽釋放酶8的表達均低于對照組(P＜0.05)。
　　 4、Morris水迷宮實驗顯示：(1)兩組仔鼠逃避潛伏期于測試第1天至第5天逐漸縮短；第5天IUGR組逃避潛伏期明顯長于對照組，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。(2)搜尋策略結果：第5天時，IUGR組和對照組成績比較有差異，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。(3)兩組穿越

6、平臺次數無明顯差異(P＞0.05)。
　　 結論：
　　 1、用6%低蛋白飲食法能建立IUGR大鼠腦損傷模型。
　　 2、IUGR仔鼠體態(tài)瘦小，腦重低，海馬神經元細胞數目少。給予IUGR仔鼠正常喂養(yǎng)，體格上可實現追趕生長，但腦重、神經元數目仍落后于正常仔鼠，并且出現學習能力的降低。
　　 3、IUGR仔鼠組織激肽釋放酶8在海馬中的表達量一直低于正常組仔鼠，組織敷肽釋放酶8表達的下降可能是IUGR發(fā)生腦損傷