金針菇菌種質量及親緣關系評價研究.pdf

1、金針菇是美味珍稀的食用菌之一，同時又具有很好的保健價值，在我國許多地區(qū)都有栽培。河北省靈壽縣、行唐縣、唐縣等是我省金針菇主產區(qū)，其生產的金針菇暢銷國內外，金針菇產業(yè)的發(fā)展對促進當?shù)亟洕蜕鐣l(fā)展起了重要的推動作用。但近幾年，在金針菇生產上出現(xiàn)一些問題，這些問題可歸結為兩個方面：一是所用金針菇菌種普遍退化、老化，造成菇農栽培風險加大，經濟效益下滑；二是金針菇菌種市場極為混亂。由于目前尚沒有關于食用菌菌種質量評價的科學體系，菌種質量和產銷管

2、理薄弱，一定程度上造成了食用菌菌種雜、多、亂現(xiàn)象的發(fā)生，嚴重損害了菇農利益。為了解決以上問題，本研究選擇了12個金針菇菌株為材料，對它們的菌種質量及親緣關系進行了評價。 主要結果如下： 1.比較了生產上常用的12個金針菇菌株菌絲的生長速度及菌落特征，同時，對12個菌株的胞外酶，包括：CMC纖維素酶、木聚糖酶、漆酶活力進行了測定，以期找出菌絲的生長速度與胞外酶活力的相關性，為正確評價菌種質量提供科學依據。實驗結果表明：12

3、個菌株間生長速度存在差異，在PDA加富培養(yǎng)基上生長較快的菌株是9號和12號菌株；在模擬出菇培養(yǎng)基上生長較快的菌株是8號、10號和12號菌株。纖維素酶及木聚糖酶活力最高的是1號菌株；漆酶活力最高的是2號菌株。 2.采用兩種方法研究了12個金針菇菌株間的親緣關系。一是采用平板對峙培養(yǎng)法觀察了12個菌株間的拮抗關系，結果表明：12個菌株間存在不同程度的拮抗現(xiàn)象，無拮抗或拮抗效果不明顯的菌株組合為：1號和6號、2號和4號、7號和10號、

4、3號和5號。二是采用PAGE技術對比了12個菌株的酯酶同工酶圖譜并進行了聚類分析，結果表明：12個菌株在遺傳距離為D=0.39處明顯地聚成5組，Ⅰ組：1號和6號，呈現(xiàn)Ec、Ed、Ei、Ek、El特征帶；Ⅱ組：2號和4號，呈現(xiàn)Ec、Ed、Ef～Ei、El特征帶；Ⅲ組：7號、8號、9號和10號，呈現(xiàn)Ed、Eh、Ei和El特征帶；Ⅳ組：3號、5號和11號，呈現(xiàn)Ea、Ed～Ei、El特征帶；Ⅴ組只有12號，呈現(xiàn)Ed、Ee、Ei和El特征帶。拮抗

5、關系法和酯酶同工酶圖譜聚類分析結果基本一致。此外還發(fā)現(xiàn)，在12個金針菇菌株的酯酶同工酶圖譜中，譜帶d、i、l為12個菌株所共有，說明這3條譜帶為金針菇的標志性譜帶，其相對遷移率分別為0.479，0.744，0.905。 3.利用PAGE電泳法顯示金針菇酯酶同工酶圖譜可用于準確分析不同菌株間的親緣關系，但考慮到菌種管理部門和菌種生產單位的實際情況，PAGE電泳法工序復雜、成本較高，為此我們研究利用醋酸纖維素薄膜電泳技術代替PAGE

6、電泳顯示金針菇酯酶同工酶圖譜，以期為菌種的良種選育、種性鑒定及菌種管理等工作提供更為簡潔、快速的方法。結果顯示：6種不同金針菇菌株醋酸纖維素薄膜電泳共出20條酯酶同工酶帶，其中相對遷移率不同的共有8條(e1-e8)，e1-e8的相對遷移率分別為：0.58，0.613，0.645，0.709，0.806，0.839，0.871，0.934。6種金針菇的電泳條帶各不相同，說明它們屬于不同的菌株，但它們之間又有共同的條帶，又證明它們有一定的親

7、緣性，其中1號和2號有3條相同的條帶，4號和5號條帶相同，3號與4號、5號有2條相同的條帶，6號與其它5種相同條帶比較少，說明1號和2號的親緣關系較近，4號和5號親緣關系較近，而3號和4號、5號親緣關系較近，而6號與其它5種親緣關系較遠。結果和PAGE電泳法顯示的金針菇酯酶同工酶圖譜基本一致。 4.金針菇是河北省主要食用菌主栽品種之一。為促進金針菇生產，保證廣大金針菇種植戶的利益，在我們研究基礎之上，起草制定了河北省金針菇菌種質