保肝寧對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子-κB的影響及對(duì)肝纖維化的調(diào)節(jié)作用研究.pdf

1、目的:研究保肝寧對(duì)活化星狀細(xì)胞HSC-T6增殖和凋亡的影響;研究保肝寧在HSC-T6上對(duì)白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和Bcl-2的調(diào)節(jié)作用;探討保肝寧對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear transcriptional factor-κB,NF-κB)及NF-κB抑制因子(inhibit-kB,IκBα)的作用,試圖闡明保肝寧抗肝纖維化的可能機(jī)制.方法:一、體外實(shí)驗(yàn):給正常wistar大鼠分組,每組十只,采用血清

2、藥理學(xué)方法,分組給予低劑量的保肝寧煎劑(保肝寧低劑量組,1.35g/ml)、高劑量的保肝寧煎劑(保肝寧高劑量組,2.7g/m1)灌胃7天,對(duì)照組大鼠給予生理鹽水,制備含藥血清及正常大鼠血清.將HSC-T6細(xì)胞傳代并培養(yǎng),分組給予藥物血清培養(yǎng)基以及正常大鼠血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,采用SRB法、熒光染色法、瓊脂糖凝膠電泳法、蛋白質(zhì)印跡法及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)觀察保肝寧對(duì)肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖、分泌、凋亡

3、的影響以及對(duì)HSC內(nèi)NF-κB之單體P50、NF-κB抑制因子(inhibit-kB,IκBα)、白細(xì)胞介素-6(interleukin 6,IL-6)以及Bcl-2表達(dá)的影響;二、體內(nèi)實(shí)驗(yàn):四氯化碳(CCl<,4>)皮下注射制作大鼠肝纖維化模型,四組造模動(dòng)物分別給予高劑量的保肝寧煎劑(保肝寧高劑量組)、低劑量的保肝寧煎劑(保肝寧低劑量組)、生理鹽水(病理組)和秋水仙堿(秋水仙堿組),生理鹽水注射的大鼠設(shè)為病理組;另設(shè)正常培養(yǎng)的大鼠,皮