2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(nicotinamidephosphoribosyltransferase,Nampt)能夠調(diào)節(jié)胰島β細胞分泌胰島素的過程,在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮重要的直接或間接作用。本課題旨在分析Nampt基因-948G>T和-3186C>T突變在中國湖南地區(qū)漢族T2DM人群中的分布頻率及其與T2DM發(fā)生的關(guān)系;探討這些突變對瑞格列奈治療T2DM的療效的影響;在細胞水平研究Nampt對胰島素分泌的調(diào)節(jié)作用及其對與胰島

2、素分泌相關(guān)的重要轉(zhuǎn)錄因子PDX-1、FoxO1基因表達的影響。
   方法:采用聚合酶鏈式反應(yīng)-限制性片斷長度多態(tài)性(PCR-RFLP)對154名2型糖尿病患者和142名健康對照者進行Nampt-948G>T基因型分析,對170名2型糖尿病患者和129名健康對照者進行Nampt-3186C>T基因型分析,隨機選擇部分樣品應(yīng)用直接測序法驗證PCR-RFLP結(jié)果;選取-3186C>T不同基因型的40名糖尿病患者進行OATP1B152

3、1T>C基因分型;選擇35名OATPlB1521TT基因型相同的個體,每天口服3mg瑞格列奈,持續(xù)8周,服藥前和服藥后第8周末收集血標本5ml;采用酶氧化法測定血糖、放射免疫法測定胰島素、高效液相色譜法測定HbAlc等反映療效的指標。用大鼠胰島素ELISA試劑盒檢測RIN-m5f細胞胰島素分泌水平。用Real-timePCR的方法檢測RIN-m5f細胞PDX-1和FoxO1的mRNA表達水平。用western-blotting的方法檢測

4、RIN-m5f細胞PDX-1蛋白表達水平。
   結(jié)果:Nampt基因-948位點在糖尿病患者和健康對照中均未檢測到突變。Nampt-3186C>T各基因型及等位基因頻率在中國漢族T2DM患者和健康對照人群中的分布差異無統(tǒng)計學意義(P=0.763,P=-0.987)。瑞格列奈治療后CT基因型患者PINS的升高值明顯低于CC基因型與TT基因型(P=0.022),CT基因型患者CHO的改變與CC基因型及TT基因型比較差異也有統(tǒng)計學意

5、義(P=0.033)。用瑞格列奈10nM+NMN100μM處理RIN-m5f細胞48h,與空白對照及DMSO對照組相比,胰島素分泌量均顯著增高(P=0.023,P=0.029),與NMN50μM組比較胰島素分泌量的增高也有統(tǒng)計學意義(P=0.049)。lOμM,50μM和100μM的NMN作用RIN-m5f細胞36h,PDX-1的mRNA表達量均上調(diào)(P值分別為0.049,0.006,0.000),lOOμM劑量組與10μM和50μM劑

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