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1、為探討黑白花陸川豬皮膚毛色形成的分子機(jī)制,應(yīng)用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)廣西本地豬同一頭陸川豬黑色和白色皮膚組織進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,分別獲得了35201618和31171136條讀段序列,其中唯一定位于豬參考基因組(Sscrofa10.2版本)分別占總讀段數(shù)的74.9%、73.6%。經(jīng)堿基測(cè)序錯(cuò)誤率分布檢查、表達(dá)標(biāo)簽測(cè)序質(zhì)量均值的分布峰值分析、ATGC含量分布檢查、測(cè)序時(shí)序列長(zhǎng)度的分布檢查及對(duì)豬參考基因組定位檢測(cè),顯示測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量較高,基因飽和度分
2、析顯示曲線斜率接近于0,說明數(shù)據(jù)接近于飽和,可用于分析基因的表達(dá)模式。
對(duì)獲得的黑色皮膚組織和白色皮膚組織轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接和系統(tǒng)的生物信息分析。多樣品差異表達(dá)基因分析可知黑色皮膚相對(duì)于白色皮膚有7個(gè)基因表達(dá)顯著上調(diào),包括:TYRPI(酪氨酸酶相關(guān)蛋白1),DCT(即TYRP2,酪氨酸酶相關(guān)蛋白2),TRPMI(瞬時(shí)受體勢(shì)M亞基1),KRT35,LOC100524022以及兩個(gè)新基因(知道基因長(zhǎng)度和編碼的蛋白,但功能注釋不全)
3、。其中TYRP1,TRPM1只在Ctrl-Hei中表達(dá)(log2FC得分分別為11.15,9.51),其次是DCT,它在黑色皮膚組織中的表達(dá)量是Ctrl-Bai中的表達(dá)量是25.67倍。再次就是兩個(gè)編碼角蛋白的基因KRT35,LOC100524022。黑色皮膚相對(duì)于白色皮膚組織有8個(gè)基因表達(dá)顯著下調(diào),包括S100A7,SI00A8,SI00AI2,SI00A9,C14H10orf99,ARG1,LOCI00738912和MMP1。他們的
4、log2FC均在4和6之間,其基因的功能主要包括四個(gè)鈣結(jié)合蛋白S100A7,S100A8,SI00AI2和SI00A9,一個(gè)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP1),一個(gè)精氨酸酶(ARG1)。對(duì)表達(dá)差異基因進(jìn)行GO分析顯示,在黑色皮膚中表達(dá)上調(diào)的基因LOCI00524022,LOC100622023,LOCI00519107,KRT74和LOC106504189顯著富集(p=0.0008)于角蛋白,因而推測(cè)黑色皮膚和白色皮膚所使用的角蛋白有所不同。差
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