2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、[目的]
   鼻咽癌為我國華南地區(qū)常見的惡性腫瘤之一,因?yàn)槿狈?duì)復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的有效控制,近年來在提高患者長期生存率方面遇到了瓶頸。傳統(tǒng)的放化療手段無法完全消除腫瘤,因其僅殺滅了已分化的低致瘤性癌細(xì)胞,而殘留的真正致瘤的腫瘤干細(xì)胞成為復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的根源。從鼻咽癌細(xì)胞中分離出腫瘤干細(xì)胞,研究其在體內(nèi)體外的生物學(xué)特性,探索鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞在分化激活的過程中,發(fā)生的代謝重編程與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化,為尋找早期診斷方法及特異性的治療手段提供新的思

2、路。
   [方法]
   (1)利用克隆形成實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證細(xì)胞的轉(zhuǎn)移生長能力,藥物毒性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證細(xì)胞的多藥耐藥性,裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證細(xì)胞的體內(nèi)致瘤性,q-RT-PCR、WB及免疫組化實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞在體內(nèi)體外腫瘤干細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)情況。
   (2)利用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)及細(xì)胞周期分析觀察細(xì)胞的增殖情況與細(xì)胞周期分布,利用JC-1染色法和ATP定量檢測(cè)等方法證觀察細(xì)胞線粒體氧化磷酸化的功能,利用乳酸定量檢測(cè)與乳酸脫氫酶活性檢

3、測(cè)等方法觀察細(xì)胞糖酵解的活性水平,利用體外血管生成實(shí)驗(yàn)等方法觀察細(xì)胞分泌上清誘導(dǎo)血管生成的能力,利用q-RT-PCR、WB及免疫組化實(shí)驗(yàn)探索可能的信號(hào)通路機(jī)制。
   (3)利用懸浮培養(yǎng)成球?qū)嶒?yàn)觀察細(xì)胞的干細(xì)胞性質(zhì),利用Transwell遷移運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)能力,利用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞侵襲能力,利用吉姆薩-瑞氏染色觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化,并利用q-RT-PCR和WB實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)基因表達(dá)情

4、況。
   [結(jié)果]
   (1)與CNE-2相比,CNE-2S具有更強(qiáng)的克隆形成能力,對(duì)多種臨床常用抗癌藥均具明顯的耐藥性,及更強(qiáng)的體內(nèi)致瘤能力,并高表達(dá)Oct4、Sox2及Nanog等腫瘤干細(xì)胞特征性轉(zhuǎn)錄因子。
   (2)經(jīng)血清誘導(dǎo)分化的CNE-2S-I出現(xiàn)了增殖激活的現(xiàn)象,且能在長期的體內(nèi)培養(yǎng)過程中保持高增殖能力,產(chǎn)生的原因與細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)變化有關(guān)。
   (3)經(jīng)血清誘導(dǎo)分化的CNE-2

5、S-I出現(xiàn)了代謝重編程,并增強(qiáng)了誘導(dǎo)血管生成能力。代謝重編程表現(xiàn)為線粒體氧化磷酸化功能的降低和糖酵解能力的加強(qiáng),而血管生成能力增強(qiáng)可能與HIF介導(dǎo)的代謝重編程有關(guān)。
   (4)經(jīng)血清誘導(dǎo)分化的CNE-2S-I喪失了腫瘤干細(xì)胞的特性但獲得了更強(qiáng)的遷移運(yùn)動(dòng)和侵襲能力,并伴隨著上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的發(fā)生。
   [結(jié)論]
   實(shí)驗(yàn)表明,本課題組分離得到的CNE-2S亞群細(xì)胞具有腫瘤干細(xì)胞的特性,可以作為鼻咽癌腫瘤干細(xì)胞的

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