一個(gè)非綜合征型視網(wǎng)膜色素變性家系致病基因的鑒定.pdf

1、視網(wǎng)膜色素變性(Retinitis Pigmentosa，RP)是一類最常見的遺傳性視網(wǎng)膜營(yíng)養(yǎng)不良癥，由視網(wǎng)膜感光細(xì)胞（包括視桿細(xì)胞和視錐細(xì)胞）或色素上皮細(xì)胞進(jìn)行性退化而導(dǎo)致視力進(jìn)行性損失，中國(guó)人群的發(fā)病率可達(dá)1/1000。其發(fā)病機(jī)制很復(fù)雜，涉及多種不同的生物代謝途徑。RP臨床上主要分為綜合征型及非綜合征型兩類，其中非綜合征型視網(wǎng)膜色素變性(Nonsyndromic retinitis pigmentosa，NSRP)占65％，其散發(fā)比

2、例高達(dá)42％。RP遺傳方式異常復(fù)雜，除了具有典型的孟德爾遺傳方式外，還存在一些罕見的非典型遺傳模式。此外，RP具有高度的臨床異質(zhì)性與遺傳異質(zhì)性，目前至少存在65個(gè)致病基因，但仍有約40％的RP患者致病原因未知。
　　目的:
　　對(duì)我室至今遺傳診斷未明確的一個(gè)NSRP家系進(jìn)行遺傳學(xué)分析，以明確其致病原因及發(fā)病機(jī)制，并對(duì)家系的患者及其他成員提供遺傳咨詢及生育指導(dǎo)，防止出生缺陷。
　　方法:
　　1、在我室前期遺傳學(xué)分

3、析的基礎(chǔ)上，對(duì)該家系的1名患者進(jìn)行進(jìn)一步的目標(biāo)基因篩查，選取近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的2個(gè)常染色體顯性RP致病基因:SNRNP200及KL HL7基因，對(duì)這2個(gè)基因的外顯子及其側(cè)翼序列進(jìn)行PCR加Sanger測(cè)序分析;
　　2、對(duì)該家系的1名患者進(jìn)行多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)(MLPA)分析，以明確RHO、RP1、IMPDH1、PRPF31、RP2及RPGR這些RP已知致病基因外顯子的大片段缺失或重復(fù)突變;
　　3、對(duì)該家系的2名患者進(jìn)行外顯

4、子組測(cè)序，并結(jié)合生物信息學(xué)分析以明確該RP家系潛在的致病原因。
　　結(jié)果:
　　1、Sanger測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)該家系患者SNRNP200及KLHL7基因編碼區(qū)不存在微小致病突變;
　　2、MLPA分析發(fā)現(xiàn)該家系患者不存在上述RP已知致病基因外顯子的大片段缺失或重復(fù)突變;
　　3、聯(lián)合外顯子組測(cè)序及生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)APOE基因存在c.784G＞A(p.Glu262Lys)及c.787G＞A(p.Glu263Lys)

5、2個(gè)雜合突變，且這2個(gè)突變位于同一條染色體上，為APOE基因罕見突變體ApoE7-Suita。該突變體在該家系中與疾病表型共分離，且在200個(gè)正常對(duì)照中未被發(fā)現(xiàn)。此外，還發(fā)現(xiàn)該家系所有患者均存在PDE6B基因c.2030C＞A雜合突變，但該突變?cè)诩蚁祪?nèi)與疾病表型不共分離。
　　結(jié)論:
　　1、本研究通過(guò)Sanger測(cè)序排除了該家系存在SNRNP200及KLHL7基因編碼區(qū)的微小致病突變，以及通過(guò)MLPA分析排除了存在RHO、