常染色體顯性遺傳視網(wǎng)膜色素變性家系視網(wǎng)膜色素變性1基因(RP1)的突變分析.pdf

1、目的：視網(wǎng)膜色素變性(retinitis pigmentosa, RP)是一組常見(jiàn)的導(dǎo)致夜盲和視野缺損的遺傳性眼底病。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有19個(gè)基因的150多個(gè)突變位點(diǎn)與其有關(guān)，其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。本研究目的是觀察常染色體顯性遺傳視網(wǎng)膜色素變性(autosomal dominant retinitis pigmentosa,ADRP)家系的視網(wǎng)膜色素1基因(retinitis pigmentosa1gene, RP1)突變特征及其在RP發(fā)

2、病機(jī)理中的作用。
　　 方法：按國(guó)際通用的ADRP診斷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所收集到常染色體顯性遺傳視網(wǎng)膜色素變性6個(gè)家系中的47例成員，抽取外周靜脈血，提取白細(xì)胞DNA，按照已發(fā)表的RP1基因序列資料(GenBank識(shí)別號(hào)為AF143222)，運(yùn)用primer 5.0軟件進(jìn)行引物設(shè)計(jì)。設(shè)計(jì)區(qū)域均覆蓋了RP1基因第四外顯子及附近拼接位點(diǎn)中的內(nèi)含子，共設(shè)計(jì)合成了5對(duì)引物。使用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction, PC

3、R)擴(kuò)增RP1基因第四外顯子基因片段，將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行DNA測(cè)序及序列分析，并隨機(jī)收集50例正常人進(jìn)行對(duì)照檢測(cè)。運(yùn)用單因素分析、多因素Logistic回歸分析研究RP1基因突變位點(diǎn)對(duì)RP的作用。
　　 結(jié)果：RP1基因第四外顯子上共檢測(cè)出2個(gè)變異位點(diǎn)。在第1691密碼子存在TCT→CCT純合與雜合兩種類(lèi)型的突變，第一個(gè)堿基發(fā)生T→C的置換，從而導(dǎo)致所編碼的氨基酸由絲氨酸(Ser)變?yōu)楦彼?Pro)。在第1725密碼子存在

4、CAA→CAG純合與雜合兩種類(lèi)型的突變，其第三個(gè)堿基由A變成G，但未引起編碼氨基酸的改變。參照國(guó)際ADRP最新的突變位點(diǎn)數(shù)據(jù)庫(kù)，1691及1725位點(diǎn)已被證實(shí)為基因多態(tài)性。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示ADRP家系成員中Ser1691Pro及Gln1725Gln位點(diǎn)突變率明顯高于正常對(duì)照組，與RP的發(fā)生呈明顯相關(guān)。
　　 結(jié)論：RP1基因Ser1691Pro位點(diǎn)和Gln1725Gln位點(diǎn)多態(tài)性可增高RP的危險(xiǎn)性，具有潛在的致病性，考慮為ADR