腦卒中后交感神經激活對單核吞噬系統(tǒng)的調控.pdf

1、研究背景:感染是腦卒中最常見的并發(fā)癥之一，嚴重影響卒中患者康復，增加病死率。近期研究表明高發(fā)的感染率可能與卒中后交感神經激活導致的機體細胞免疫抑制有關。為更好地了解中樞神經系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)之間的復雜關系，也為急性卒中患者尋找更有效的治療方法，本研究首先建立局灶性腦缺血再灌注大鼠模型，以6-羥基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）阻斷交感神經，觀察交感神經對局灶性腦缺血再灌注大鼠單核巨噬細胞免疫功能的影響。
　　

2、目的:探討交感神經對局灶性腦缺血再灌注大鼠細胞免疫功能的影響。
　　方法:將成年雄性SD大鼠按隨機數(shù)字法分成實驗組(6-OHDA+MCAO)、對照組(MCAO)和假手術組（Sham）。采用血管內線栓法制作大鼠大腦中動脈閉塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)再灌注模型，大腦中動脈閉塞時間為90分鐘。實驗組在做缺血再灌注模型前需連續(xù)3天腹腔注射6-羥基多巴胺阻斷交感神經。造模后1天、3天、

3、7天、14天采用Longa評分法進行神經行為學評分;采用7.0T小動物核磁共振儀檢測腦梗死容積;采用流式細胞術檢測外周血單核巨噬細胞、肺泡灌洗液中單核巨噬細胞及脾臟單核巨噬細胞表面MHCⅡ分子表達;采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)測定LPS刺激后大鼠單核巨噬細胞釋放促炎細胞因子TNF-α、IFN-γ的水平;Western Blotting法測定術后3天單核巨噬細胞中β

4、-arrestins和NF-κB蛋白的表達水平。
　　結果:
　　1、各時間點實驗組和對照組的神經行為學評分、腦梗死容積無差異(p＞0.05)。
　　2、外周血、肺泡灌洗液及脾臟的單核巨噬細胞表面MHCⅡ類分子表達:在多數(shù)時間點實驗組表達明顯高于對照組(p＜0.05)，低于假手術組。
　　3、LPS刺激后各組大鼠肺泡巨噬細胞及脾臟的巨噬細胞TNF-α和IFN-γ的表達:實驗組與對照組TNF-α和IFN-γ的走勢相

5、似，均在第1天最高，高于假手術組水平，隨后下降，3天達到最低，低于假手術組(p＜0.05)，以后緩慢回升，14天后對照組仍低于假手術組，實驗組基本達到假手術組水平。實驗組各個時間點TNF-α和IFN-γ的值均高于對照組，3天時兩組差異最明顯(p＜0.05)。
　　4、3天時肺泡灌洗液、脾臟巨噬細胞內β-arrestin2和NF-κB的表達:實驗組肺泡巨噬細胞及脾臟巨噬細胞內β-arrestin2表達較對照組有明顯降低，差異都有統(tǒng)計