射頻消融腎交感神經(jīng)對(duì)高血壓犬腎交感神經(jīng)分泌的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的:1、觀察肥胖性高血壓模型犬中血漿去甲腎上腺素(NE)及腎臟局部交感神經(jīng)遞質(zhì)NE、神經(jīng)肽Y(NPY)、兒茶酚胺抑素(CST)的水平，及射頻消融腎交感神經(jīng)(RDN)對(duì)血壓、上述遞質(zhì)的影響，分析上述遞質(zhì)水平與血壓的相關(guān)關(guān)系。2、觀察肥胖性高血壓模型犬中腎臟血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)-血管緊張素(1-7)(Ang(1-7))-Mas軸的水平，及RDN對(duì)該軸表達(dá)的影響，分析該軸變化與血壓及上述遞質(zhì)水平的相關(guān)關(guān)系。3、研究NE對(duì)人近端腎小

2、管上皮細(xì)胞（HK-2）分泌ACE2、Ang(1-7)及Mas的影響。
　　方法:1、采用Beagle犬，以正常飲食為對(duì)照組，以高脂飲食建立肥胖性高血壓犬模型，隨機(jī)分為手術(shù)組(RDN)、假手術(shù)組（腎動(dòng)脈造影）。于基線、建模后即術(shù)前、術(shù)后6月測(cè)定體重、心率、血壓及血漿NE。術(shù)后6月處死，采用高效液相法測(cè)定血漿及腎臟NE水平，PCR、Western Blot及免疫組化法測(cè)定腎臟NPY、ACE2、MasmRNA和蛋白表達(dá)，ELISA測(cè)定腎

3、臟CST及Ang(1-7)濃度。比較模型組與對(duì)照組，手術(shù)組與假手術(shù)組上述指標(biāo)的差異。2、培養(yǎng)HK-2細(xì)胞，采用NE（10-8～10-4mol/L），設(shè)緩沖液為對(duì)照，干預(yù)24h，PCR、Western Blot檢測(cè)ACE2、Mas mRNA和蛋白表達(dá)，ELISA測(cè)定Ang(1-7)濃度。比較NE干預(yù)對(duì)上述指標(biāo)表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:1、肥胖性高血壓模型犬SBP、DBP和MAP水平明顯高于對(duì)照組(P＜0.05);術(shù)后6月，手術(shù)組SBP

4、、DBP和MAP水平顯著低于假手術(shù)組(P＜0.05)。2、肥胖性高血壓模型犬血漿NE水平明顯高于對(duì)照組(P＜0.05);術(shù)后6月，手術(shù)組血漿及腎臟NE水平顯著低于假手術(shù)組(P＜0.05)，手術(shù)組、假手術(shù)組及對(duì)照組間NPY、CST mRNA與蛋白表達(dá)均無差異(P＞0.05)。血漿及腎臟NE水平與SBP呈正相關(guān)(P＜0.05)，而NPY、CST與SBP無明顯相關(guān)性(P＞0.05)。3、術(shù)后6月，手術(shù)組腎臟ACE2、Mas mRNA和蛋白及A

5、ng(1-7)表達(dá)顯著高于假手術(shù)組(P＜0.05);假手術(shù)組腎臟ACE2、Mas mRNA和蛋白及Ang(1-7)表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)。腎臟ACE2、Ang(1-7)、Mas與SBP均呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。4、中高濃度NE(10-6mol/L～10-4mol/L)降低HK-2細(xì)胞ACE2、Mas mRNA表達(dá)水平，呈濃度依賴性，且可降低HK-2細(xì)胞Ang(1-7)表達(dá)(P＜0.05);高濃度NE(10-4mol/L)可

6、抑制ACE2、Mas蛋白水平(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1、肥胖性高血壓模型犬血壓升高，伴血漿及腎臟NE明顯上升，兒茶酚胺共分泌遞質(zhì)NPY、CST無變化;RDN可降壓，伴血漿及腎臟NE水平下降，對(duì)NPY、CST無影響。NE與SBP呈正相關(guān)。2、肥胖性高血壓模型犬腎臟ACE2、Ang(1-7)和Mas表達(dá)下降;RDN可上調(diào)ACE2-Ang(1-7)-Mas軸，該軸與SBP呈負(fù)相關(guān)。3、高濃度NE可下調(diào)HK-2細(xì)胞ACE2-Ang(