E2F-1、PCNA、MDM2和p53在河南省林州市食管鱗癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景及目的：
　　 食管癌( esophageal carcinoma)是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅人類的健康；研究其發(fā)病機(jī)制將有助于臨床診治。
　　 流行病學(xué)及病因?qū)W研究證實(shí)，食管癌的發(fā)生與地理環(huán)境、遺傳因素、生活習(xí)慣、年齡、性別、職業(yè)、種族等有密切的關(guān)系。多數(shù)食管癌患者在確診前已經(jīng)發(fā)生外侵、轉(zhuǎn)移。腫瘤的發(fā)生及轉(zhuǎn)移是一個多因素、多步驟的過程，涉及到癌基因及抑癌基因的表達(dá)失調(diào)、細(xì)胞周期調(diào)控失常等多方面機(jī)制。核轉(zhuǎn)錄因

2、子-1（transcription factors-1，E2F-1）是核轉(zhuǎn)錄因子E2Fs家族的重要成員之一，其通過對細(xì)胞轉(zhuǎn)錄、增殖、凋亡等活動的調(diào)節(jié)，可使細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期，與腫瘤細(xì)胞的凋亡、細(xì)胞增殖和發(fā)育有密切的關(guān)系。增殖細(xì)胞核抗原（Proliferating cell nuclearantigen，PCNA）在細(xì)胞周期過程起到重要的作用；PCNA的合成和表達(dá)代表著細(xì)胞的增殖狀態(tài)，被認(rèn)為是反映細(xì)胞增殖活性的良好指標(biāo)。小鼠雙微體( m

3、urinedoublemimute2，MDM2)基因是一種癌基因，p53是一種重要的腫瘤抑制基因，二者可調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，參與大多數(shù)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。
　　 本研究采用免疫組織化學(xué)方法研究E2F-1、PCNA、MDM2及p53在高發(fā)區(qū)食管鱗癌組織中的表達(dá)情況，探討其在食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及其與食管鱗癌臨床病理特征的關(guān)系，為食管鱗癌的臨床診斷和治療提供基礎(chǔ)理論。
　　 材料和方法：
　　 1標(biāo)本本研究隨機(jī)選取林州

4、市腫瘤醫(yī)院2008年8月～2009年3月手術(shù)切除的食管鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本49例，并同時提取距腫瘤大于5cm處的正常食管組織作為對照組；全部標(biāo)本經(jīng)10％中性福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋。49例患者中男性27例、女性22例，年齡46～87歲，平均年齡為(60.40±8.60)歲。所有病例均按照國際抗癌聯(lián)盟食管癌分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期：其中Ⅰ期5例、Ⅱ期31例、Ⅲ期13例。分化程度：其中高分化10例、中分化26例、低分化13例；浸潤深度：20例浸及纖維

5、膜、29例未浸及纖維膜；19例患者有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、30例患者無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。所有患者術(shù)前均未行放、化療及其它抗癌治療。
　　 2研究方法每例標(biāo)本4μm厚連續(xù)切片6張，4張供免疫組化染色用，1張供HE染色、1張備用。采用免疫組織化學(xué)法檢測E2F-1、PCNA、MDM2和p53的表達(dá)情況。
　　 3免疫組化結(jié)果判定陽性染色指細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒，E2F-1、PCNA、MDM2和p53陽性表達(dá)定位于細(xì)胞核。每張切片隨機(jī)選擇

6、10個不重復(fù)的高倍視野（40×10倍），每個視野計(jì)數(shù)100個細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞占總體細(xì)胞的百分比；規(guī)定無明確陽性細(xì)胞或陽性細(xì)胞百分比＜15％為陰性（一），陽性細(xì)胞百分比≥15％為陽性。
　　 4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件進(jìn)行處理；樣本陽性率的比較采用x2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)取α=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1E2F-1的表達(dá)E2F-1在癌旁正常食管組

7、織中的陽性表達(dá)率為8.16％，在食管鱗癌組織中為51.02％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。E2F-1在有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性表達(dá)率為78.95％和33.33％;E2F-1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中的陽性表達(dá)率為20.00％、35.48％和84.62％;E2F-1在高-中、低分化組中的陽性表達(dá)率為38.89％和84.62％;E2F-1在浸及與未浸及纖維膜組中的陽性表達(dá)率為70.00％和37.93％。E2F-1的表達(dá)與性別、年齡無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、分化

8、程度、浸潤深度及TNM分期有關(guān)(P＜0.05)。
　　 2PCNA的表達(dá)PCNA在癌旁正常食管組織中的陽性表達(dá)率為8.16％，在食管鱗癌組織中為69.39％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PCNA在有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性表達(dá)率為94.74％和53.33％;PCNA在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中的陽性表達(dá)率為20.00％、67.74％和92.31％;PCNA在高-中、低分化組中的陽性表達(dá)率為58.33％和100.00％;PCNA在浸及與未浸及纖維膜組中

9、的陽性表達(dá)率為90.00％和55.17％。PCNA的表達(dá)與性別、年齡無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤深度、分化程度及TNM分期有關(guān)(P＜0.05)。
　　 3MDM2的表達(dá)MDM2在癌旁正常食管組織中的陽性表達(dá)率為22.45％，在食管鱗癌組織中為55.10％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MDM2在有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性表達(dá)率為84.21％和36.67％;MDM2在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中的陽性表達(dá)率為20.00％、45.16％和92.31％;MDM

10、2在高-中、低分化組中的陽性表達(dá)率為44.44％和84.62％;MDM2在浸及與未浸及纖維膜組中的陽性表達(dá)率為75.00％和41.38％。MDM2的表達(dá)與性別、年齡無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、分化程度、浸潤深度及TNM分期有關(guān)(P＜0.05)。
　　 4p53的表達(dá)p53在癌旁正常食管組織中的陽性表達(dá)率為12.24％，在食管鱗癌組織中為61.22％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。p53在有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性表達(dá)率為84.21％和46.67

11、％;p53在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中的陽性表達(dá)率為0.00％、61.29％和84.62％;p53在高-中、低分化組中的陽性表達(dá)率為52.78％和84.62％;p53在浸及與未浸及纖維膜組中的陽性表達(dá)率為80.00％和48.28％。p53在食管鱗癌中的陽性表達(dá)與性別、年齡無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、分化程度及浸潤深度有關(guān)(P＜0.05)。
　　 5相關(guān)性分析結(jié)果顯示，PCNA在食管鱗癌組織中的表達(dá)與E2F-1、MDM2、p53之間分

12、別存在正相關(guān)，關(guān)聯(lián)系數(shù)分別為0.308、0.424、0.355;E2F-1在食管鱗癌組織中的表達(dá)與MDM2之間存在正相關(guān)，關(guān)聯(lián)系數(shù)(r)為0.455;在食管鱗癌組織中E2F-1與p53的表達(dá)之間、MDM2與p53的表達(dá)之間無明顯相關(guān)性。
　　 結(jié)論：
　　 1E2F-1、PCNA、MDM2和p53與食管鱗癌的發(fā)生有關(guān)；
　　 2E2F-1、PCNA、MDM2和p53的表達(dá)與患者的年齡、性別無關(guān)；與食管鱗癌的浸潤深