藏藥紫金標(biāo)抗HSV-1作用及其作用機(jī)制的研究.pdf

1、本研究包括三部分內(nèi)容.第一部分為體外藥效學(xué)實(shí)驗(yàn).研究采用MTT法檢測(cè)紫金標(biāo)對(duì)Vero細(xì)胞的半數(shù)中毒濃度(TC<,50>)為1077mg·L<'-1>,紫金標(biāo)抗HSV-1的半數(shù)抑制濃度(IC<,50>)為29.46mg·L<'-1>,治療指數(shù)(TI)為36.56;陽(yáng)性對(duì)照無(wú)環(huán)鳥苷(ACV)的IC<,50>為9.12mg·L<'-1>,TC<,50>為330mg·L<'1->,TI為36.18,證實(shí)紫金標(biāo)與ACV對(duì)HSV-1的治療指數(shù)無(wú)顯著

2、性差異.用透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)紫金標(biāo)按625mg·L<,50>給藥后病毒被明顯抑制.體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明紫金標(biāo)在無(wú)毒劑量范圍時(shí)有抗HSV-1效果,劑量越大作用越明顯.還研究了紫金標(biāo)對(duì)HSV-1復(fù)制動(dòng)力學(xué)的影響,即不同時(shí)間和不同給藥濃度對(duì)病毒抑制的影響,找出紫金標(biāo)體外給藥抑制HSV-1活性的時(shí)間規(guī)律,為紫金標(biāo)的開發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).156～625mg·L<'-1>的紫金標(biāo)于感染后0～12h給藥均有明顯抑制效應(yīng),其中感染后0~2h給藥抑制率最高.第

3、二部分為體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn).通過對(duì)小鼠進(jìn)行HSV-1的角膜局部接種、尾靜脈全身接種建立了兩種HSV-1致病模型,研究了紫金標(biāo)對(duì)皰疹性角膜炎和HSV-1全身感染的治療作用.實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),紫金標(biāo)可減輕組織的病理?yè)p害,明顯減少或消除臟器內(nèi)的病毒抗原,最大無(wú)毒劑量(0.3g/kg/d)的紫金標(biāo)對(duì)HSV-1有明顯的對(duì)抗作用,其效果與臨床用的抗病毒藥物ACV相似;紫金標(biāo)對(duì)皰疹性角膜炎有治療作用.第三部分為紫金標(biāo)的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn),初步揭示了紫金標(biāo)抗HSV-1

4、作用機(jī)制.首先,取不同稀釋度的紫金標(biāo)分別與HSV-1病毒原液混合,37℃吸附2 h,滴定病毒TCID<,50>.其結(jié)果與未加紫金標(biāo)作用于HSV-1的TCID<,50>相同,表明紫金標(biāo)對(duì)HSV-1無(wú)直接作用.采用蝕斑法和掃描電鏡證實(shí)用625mg·L<'-1>紫金標(biāo)預(yù)處理細(xì)胞,可顯著抑制HSV-1對(duì)Vero細(xì)胞吸附.用CPE法滴定病毒,細(xì)胞內(nèi)病毒滴定前進(jìn)行3次凍融,在所用濃度范圍內(nèi),紫金標(biāo)對(duì)病毒釋放未見明顯影響,說明紫金標(biāo)不影響病毒從感染細(xì)