桑樹內生真菌的分離鑒定及產油菌Macrophomina phaseolina MOD-1的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目前,國內外學者已對多種經濟林木和藥用植物內生真菌及其次生代謝產物等多方面內容進行過研究,發(fā)現(xiàn)植物內生真菌普遍存在于各種植物中,在植物體內能產生多種具有生物活性的次生代謝產物,具有抗腫瘤、殺菌、殺蟲、調節(jié)植物生長及增強植物抗性等不同作用。而關于桑樹中有無內生真菌及其次生代謝產物研究還未見報道。有鑒于此,本文從四個桑樹品種中分離內生真菌并進行了相關研究。主要結果如下: 1.用組織分離法結合表面消毒有效性評價,從四個桑樹品種中共分離

2、出內生真菌114株。經顯微形態(tài)觀察,初步歸屬為鐮孢霉屬Fusarium、鏈格孢屬Alternaria、柱霉屬Scytalidium等21個屬,表明桑樹內生真菌具有豐富的生物多樣性。研究發(fā)現(xiàn)不同桑樹品種之間內生真菌的分布有一定的差異,同一桑樹品種不同器官內生真菌的種類和數(shù)量差異較大,根中最多,莖中次之,葉中最少。鐮孢霉屬為根中優(yōu)勢種群,鏈格孢屬為莖、葉中的優(yōu)勢種群,叢梗孢屬Monilia和鐮孢霉屬菌株在根、莖、葉中均能分離到,其它屬的菌株

3、只存在于其中的某一個或兩個器官組織。 2.運用顯微形態(tài)觀察和蘇丹Ⅲ染色法從桑樹內生真菌中篩選出一株產油菌株。用形態(tài)學和分子生物學方法鑒定并命名為桑樹內生菜豆殼球孢菌MOD-1(Mulberry endophyte Macrophomina phaseolina MOD-1)。菌株的5.8S rDNA/ITS區(qū)段序列已在GeneBank中注冊,登錄號為EU250575。經測定菌體含油量達22.72%,且對纖維素有一定的降解能力。

4、 3.用酸熱法提取油脂,油脂甲酯化后采用氣.質聯(lián)用儀進行了MOD-1菌株油脂脂肪酸組成的定性分析和相對含量測定。結果表明:MOD-1菌株油脂包含18種脂肪酸,其中不飽和脂肪酸含量為69.88%,主要為反油酸(37.80%)、亞油酸(13.55%)、棕櫚油酸(10.71%)、油酸(6.72%),還有少量的十四碳烯酸、二十碳二烯酸、二十碳四烯酸等不飽和脂肪酸;飽和脂肪酸含量為30.12%,主要為棕櫚酸(19.56%)、硬脂酸(8.22

5、%)、花生酸(1.11%)、肉豆蔻酸(0.51%)以及少量的月桂酸、十五烷酸、十七烷酸、山崳酸等飽和脂肪酸。 4.運用光學顯微鏡、透射電鏡技術觀察了MOD-1菌株不同發(fā)育階段的油脂形成、積累的過程,并對此菌株油脂的形成機制進行了探討。結果表明:MOD-1油脂的產生和積累跟菌絲的生長和菌核的分化幾乎同步進行:每個細胞的胞質內首先產生大量的嗜鋨顆粒、蛋白-脂類復合體;伴隨MOD-1菌體細胞的生長發(fā)育,細胞內嗜鋨顆粒和蛋白-脂類復合體

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