紫花苜蓿內(nèi)生菌的分離鑒定及特性分析.pdf

1、植物內(nèi)生菌種類繁多，廣泛分布于多種植物的各個器官和組織中。植物內(nèi)生菌通過分泌多種有益代謝物、與病原菌競爭生態(tài)位點(diǎn)和營養(yǎng)物質(zhì)、誘導(dǎo)植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗性等不同機(jī)制幫助植物抵抗病害。紫花苜蓿（Medicago sativa）是一種歷史悠久的多年生豆科牧草，其營養(yǎng)豐富，含有多種必需氨基酸、稀有氨基酸和可消化蛋白，并具有耐貧瘠、抗干旱等優(yōu)良特性。本研究以紫花苜蓿內(nèi)生細(xì)菌為實驗材料，評價其生防效果和生防特性，結(jié)果如下：
　　1、紫花苜蓿內(nèi)生細(xì)菌的

2、分離篩選及鑒定
　　本研究從紫花苜蓿中分離出60株內(nèi)生細(xì)菌，通過平板對峙實驗篩選出6株對尖孢鐮刀菌有拮抗作用的菌株，根據(jù)16S rDNA序列分析、菌落形態(tài)和生理生化實驗初步鑒定菌株Y1和Y5為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）、G43為綠針假單胞菌（Pseudomonas chlororaphis）、Y22為河生腸桿菌（Enterobacter amnigenus）、G62為假單胞菌 Pseudomonas arg

3、entinensis、G68為霍氏腸桿菌（Enterobacter hormaechei）。
　　2、紫花苜蓿內(nèi)生細(xì)菌生防效果評價
　　在平板對峙實驗中，6株紫花苜蓿內(nèi)生細(xì)菌能夠不同程度地拮抗多種病原真菌；而且，6株菌株發(fā)酵液均能抑制尖孢鐮刀菌菌絲及孢子正常生長，導(dǎo)致菌絲斷裂、畸形，孢子數(shù)量明顯減少；在盆栽實驗中，經(jīng)6株菌株處理的苜蓿病情均得到不同程度地緩解，其中，菌株Y22防效最高，為53.97％。
　　3、紫花苜蓿

4、內(nèi)生細(xì)菌生物學(xué)特性分析
　　本研究評價了6株紫花苜蓿內(nèi)生細(xì)菌產(chǎn)嗜鐵素能力、產(chǎn)HCN能力、幾丁質(zhì)酶活力和羧甲基纖維素酶活力。6株菌株均能產(chǎn)生嗜鐵素和幾丁質(zhì)酶，菌株 Y22合成嗜鐵素能力最強(qiáng)，其相對含量為0.521，菌株 G62幾丁質(zhì)酶活力最高，其值為0.355 IU/mL。除菌株G62外，其余菌株均能產(chǎn)生HCN，其中菌株G43產(chǎn)HCN能力最強(qiáng)。菌株Y1和Y5能產(chǎn)生羧甲基纖維素酶，其酶活力值分別為0.486 IU/mL和0.360 I