紅花黃色素對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦病的保護(hù)作用.pdf

1、目的：1、研究紅花黃色素(SY)對(duì)缺氧缺血性腦損傷(HIBD)新生大鼠腦海馬CA1區(qū)APE/Ref-1蛋白表達(dá)及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。 2、探討缺氧缺血后APE/Ref-1蛋白的表達(dá)在海馬CA1區(qū)的變化與該區(qū)神經(jīng)元凋亡之間的內(nèi)在聯(lián)系。 3、探討紅花黃色素對(duì)缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用的可能機(jī)制。 方法：新生7日齡Sprague-Dawley(SD)大鼠72只，體重12-16g。通過隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為三組：(1)

2、假手術(shù)組(24只)：僅游離左右兩側(cè)頸總動(dòng)脈，不結(jié)扎，直接縫合皮下組織及皮膚。不作注射藥物等其他處理。(2)缺氧缺血(HIBD)組(24只)：建立HIBD模型后不再作其他處理。(3)紅花黃色素(SY)組(24只)：建立HIBD模型后，分別在造模后即刻、造模后4h給予腹腔注射紅花黃色素3mg/kg。每組分別于造模后6h、12h、24h、48h各處死6只，灌注固定后取腦組織常規(guī)石蠟包埋、切片，采用TUNEL方法檢測海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，

3、免疫組織化學(xué)染色法檢測APE/Ref-1的表達(dá)。測定凋亡的陽性細(xì)胞數(shù)及APE/Ref-1表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)。用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1、TUNEL檢測神經(jīng)細(xì)胞凋亡的結(jié)果： (1)假手術(shù)組：新生大鼠腦海馬CA1區(qū)可見少量凋亡的神經(jīng)細(xì)胞，各時(shí)間點(diǎn)之間無顯著差異(p＞0.05)。 (2)HIBD組：凋亡細(xì)胞增加明顯，且隨時(shí)間變化呈上升趨勢，差異有統(tǒng)計(jì)

4、學(xué)意義(p＜0.05)。與假手術(shù)組在12h、24h、48h相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。 (3)SY組：在6h凋亡的細(xì)胞數(shù)比HIBD組在6h凋亡的細(xì)胞數(shù)減少，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。在12h、24h、48h凋亡的細(xì)胞數(shù)則比HIBD組減少明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。 2、免疫組織化學(xué)染色法檢測APE/Ref-1表達(dá)的結(jié)果： (1)假手術(shù)組：新生大鼠腦海馬CA1區(qū)可見APE/Ref-

5、1廣泛表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)之間無顯著差異(p>0.05)。 (2) HIBD組：APE/Ref-1表達(dá)下降明顯，差異隨時(shí)間變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，與假手術(shù)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。 (3)SY組：在6h，APE/Ref-1表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)與假手術(shù)組相比，差異未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在各時(shí)間點(diǎn)APE/Ref-1表達(dá)下降程度則均比HIBD組明顯減輕，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。 3、通過對(duì)比海馬CA

6、1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡與APE/Ref-1表達(dá)的陽性細(xì)胞的變化趨勢：隨著APE/Ref-1表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)的減少，海馬CA1區(qū)凋亡的神經(jīng)細(xì)胞逐漸增多。 結(jié)論： 1、紅花黃色素能明顯抑制缺氧缺血后APE/Ref-1表達(dá)的下降，明顯減少神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)具有保護(hù)作用。 2、APE/Ref-1的表達(dá)可能在抗神經(jīng)細(xì)胞的凋亡中起著重要的作用。 3、紅花黃色素對(duì)缺氧缺血新生大鼠的腦保護(hù)作用機(jī)制可能與抑制APE/Re