Caveolin-1通過Wnt-β-catenin途徑調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞礦化及其機(jī)制研究.pdf

1、南昌大學(xué)碩士學(xué)位論文Caveolin-1通過Wnt/β-catenin途徑調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞礦化及其機(jī)制研究姓名：何歡申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：彭維杰20100601A B S T R A C TA B S T R A C To b j e c t i v e ：T h ep r e s e n ts t u d yw a s t oi n v e s t i g a t e t h ee f f e c t sa n dm e

2、 c h a n i s m so f c a v e o l i n - lv i a W n t ／p —c a t e n i np a t h w a y so nt h e p r o l i f e r a t i o na n dd i f f e r e n t i a t i o n o fo s t e o b l a s t i cM C 3 T 3 ．E 1 ．M e t h o d a n d R e s u

3、l t s ：1 ．O nd i f f e r e n tg r o w i n g d a y ( 3 ，6 ，9 ，1 2 ，1 5 ，1 8d a y ) ，w e o b s e r v e dt h ee x p r e s s i o no f c a v e o l i n - 1 p r o t e i na n dp - c a t e n i np r o t e i nv i aW e s t e r nB l

4、o t t i n g ，a n dt h ee x p r e s s i o no f 1 3 一c a t e n i nm R N A v i aR T - P C R o no s t e o b l a s t i cM C 3 T 3 一E 1 ．T h ep r o t e i ne x p r e s s i o no fc a v e o l i n 一1 a n d1 3 - c a t e n i nw e r

5、eg r a d u a l l yd e c r e a s e da f t e r t h e n i n t h d a y , b u tt h em R N A e x p r e s s i o n o f1 3 - c a t e n i n w e r en o s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e so n d i f f e r e n tg r o w i n gd a

6、 y ( 3 ，6 ，9 ，1 2 ，1 5 ，1 8 d a y ) ．2 ．T h ed i f f e r e n t i a t i o no fo s t e o b l a s t i cM C 3 T 3 一E 1 W a s r e s p e c t i v e l yd e p r e s s i o n e db yG S K 一3 pi n h i b i t o r - L i C l ( 5 ，1 0 m M

7、 ) a f t e r t h e 9 ，1 2 ，1 5 ，1 8 t hd a y ．T h ep r o t e i ne x p r e s s i o no fc a v e o l i n 一1 w e r en os i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s i nL i C lg r o u pc o m p a r e dw i t hc o n t r o lg r o u

8、 p ，b u tt h ep r o t e i n e x p r e s s i o no f1 3 - c a t e n i n w e r ed i f f e r e n c e s t h a td i f f e r e n td e n s i t yL i C l g r o u p o b v i o u s l y h i g h e r t h a nc o n t r o l g r o u p ．3 ．W

9、 r e u s e t h e R N A i p l a s m i d p G e n e s i l 一1 ．1 一c a v ·1t od o w n - r e g u l a t et h ee x p r e s s i o no f c a v e o l i n —la f t e rt h e t r a n s f e c t i o n o n t h i r dd a y ．·T h ep

10、 r o t e i ne x p r e s s i o no fp - c a t e n i ni s g r a d u a l l yd e c r e a s e da l o n gw i t hr e d u c e dt h e p r o t e i ne x p r e s s i o n o f c a v e o l i n - 1 ．4 ．T h ed i f f e r e n t i a t i o na

11、 n dm i n e r a l i z a t i o n o f o s t e o b l a s t i cM C 3 T 3 一E 1 W a s r e s p e c t —i v e l ye v a l u a t e d b yA L P a c t i v i t yi nc e l ll y s i s ( p N P P ) i n m e d i u m a f t e rt h e 6 ，9 ，1 2 ，

12、1 5 t hd a ya n dm i n e r a l i z e dn o d u l ef o r m a t i o nA l i z a r i nR e dSs t a i n i n gi nm e d i u ma f t e rt h el 8 ，2 5 ，3 0 t hd a y ．A L P a c t i v i t yw e r en os i g n i f i c a n td i f f e r e

13、n c e s i nL i C Ig r o u p c o m p a r e d w i t hc o n t r o lg r o u p ．M i n e r a l i z e dn o d u l e f o r m a t i o nw a s s u b s t a n t i a lb u tr e d u c e d i fL i C lt r e a t m e n t w a s i n i t i a t e