生長抑素受本介導(dǎo)的靶向治療小細(xì)胞肺癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：肺癌是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤，小細(xì)胞肺癌(small cell lungcancer，SCLC)大約占全部肺癌的20％，2/3的患者在確診時已進(jìn)入臨床晚期或已出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，因此化療和放療成為治療SCLC的主要手段。目前，小分子多肽及其受體作為惡性腫瘤診斷治療的分子靶點(diǎn)已經(jīng)成為了研究的熱點(diǎn)，生長抑素受體(somatostatin receptor,SSTR)是其中的典型代表。許多研究結(jié)果表明大多數(shù)SCLC組織有SSTR的表達(dá)，而

2、且明顯高于正常器官和組織。細(xì)胞毒藥物和生長抑素類似物(somatostatin analog，SSA)的偶聯(lián)物可以和SSTR進(jìn)行特異性結(jié)合，經(jīng)由內(nèi)吞作用進(jìn)入到腫瘤細(xì)胞，起到靶向化療的作用。
　　 目的：評價奧曲肽紫杉醇偶聯(lián)物（paclitaxel-octreotide conjugates）對人小細(xì)胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)H446細(xì)胞的毒性和靶向性，探討SSTR在治療人SCLC中的作用。<

3、br>　　 方法：合成并純化奧曲肽紫杉醇偶聯(lián)藥物PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT、2PTX-OCT和2PTX-Tyr-OCT，熒光實(shí)時定量PCR法檢測H446細(xì)胞以及人成纖維細(xì)胞SSTR的表達(dá)，四甲基偶氮唑藍(lán)微量酶反應(yīng)比色(MTT)法檢測不同時間和濃度梯度的偶聯(lián)物對H446以及人成纖維細(xì)胞的抑制率，流式細(xì)胞儀檢測1000nmol/L紫杉醇、PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT、2PTX-OCT和2PTX-Tyr-OCT作用后H

4、446細(xì)胞的凋亡率和細(xì)胞周期的變化。
　　 結(jié)果：H446細(xì)胞SSTR1～5mRNA均檢測到較高量的表達(dá)，其中以SSTR1和SSTR5的表達(dá)量最高，5種SSTR表達(dá)量依次為SSTR1:(2.65±0.34)×10-2,SSTR2:(9.25±1.58)×10-5,SSTR3:(2.42±0.23)×10-4，SSTR4:(4.26±0.75)×10-5，SSTR5:(7.24±1.26)×10-3；而成纖維細(xì)胞中未檢測到SSTR

5、 mRNA的表達(dá)。偶聯(lián)藥物對H446細(xì)胞殺傷的作用與紫杉醇類似，具有濃度和時間依賴性；1000nmol/紫杉醇、PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT、2PTX-OCT和2PTX-Tyr-OCT作用72h后，H446細(xì)胞生存率分別為(31.7±5.9)％、(37.3±6.2)％、(35.7±2.3)％、(29.3±7.8)％、(34.2±4.3)％，均明顯低于24h組(P＜0.05）。1000nmol/L紫杉醇作用24h后，人成纖維細(xì)胞

6、生存率為(55.1±3.2)％，而PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT、2PTX-OCT和2PTX-Tyr-OCT組為(85.2±2.8)％、(84.8±1.6)％、(90.3±4.6)％、(90.5±3.8)％,均明顯高于紫杉醇組(P＜0.05)。流式細(xì)胞儀分析1000nmol/L PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT、2PTX-OCT和2PTX-Tyr-OCT作用后，H446細(xì)胞G2/M期的比例分別為(74.58±4.31)％、

7、(73.95±5.72)％、(76.13±1.84)％、(75.46±2.72)％，對照組細(xì)胞的G2/M期的比例為(14.56±1.86)％，各偶聯(lián)藥物處理組與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：奧曲肽紫杉醇偶聯(lián)物PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT、2PTX-OCT和2PTX-Tyr-OCT可以明顯抑制SSTR高表達(dá)的SCLC細(xì)胞株H446的生長，對于不表達(dá)SSTR的成纖維細(xì)胞，偶聯(lián)藥物則表現(xiàn)出低毒性，