IL-6對(duì)apoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展及ABCA1-G1表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]
　　IL-6是一種多效性的細(xì)胞因子,與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。為了驗(yàn)證在慢性炎癥過程中,IL-6對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的影響,本研究擬在干酪素誘導(dǎo)的慢性炎癥模型中,觀察 IL-6受體阻斷劑tocilizumab對(duì)apoE基因敲除(apoE-/-)小鼠ABCA1和ABCG1表達(dá)及動(dòng)脈粥樣硬化形成的影響,并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行探討,以便明確IL-6在防治動(dòng)脈粥樣硬化中的作用。
　　[方法]
　　48只8周齡雄性a

2、poE-/-小鼠隨機(jī)分為四組,每組12只。所有小鼠都給予高脂高膽固醇飼料(15％豬油+0.25%膽固醇)飼養(yǎng)?；A(chǔ)組每天皮下注射0.5 ml蒸餾水,飼養(yǎng)至第14周處死;Tocilizumab處理組每天皮下注射0.5 ml蒸餾水,自第9周開始每周給予Tocilizumab(8mg/kg)腹腔注射一次。炎癥組每天皮下注射0.5 ml干酪素飼養(yǎng)至第14周處死;Tocilizumab治療組每天皮下注射0.5 ml干酪素,自第9周開始每周給予To

3、cilizumab(8mg/kg)腹腔注射一次。采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)apoE-/-小鼠血漿C反應(yīng)蛋白、TNFα、IL-1β和IL-10水平;氧化酶法測(cè)定 apoE-/-小鼠血漿甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇含量;免疫比濁法檢測(cè)血漿載脂蛋白A-I和apoB含量;實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)apoE-/-小鼠主動(dòng)脈、肝臟及小腸ABCA1和ABCG1基因表達(dá);Western印跡法檢測(cè)apoE-/-小鼠主動(dòng)脈、肝臟及小腸ABCA

4、1和ABCG1蛋白質(zhì)表達(dá);冰凍切片油紅O染色檢測(cè)apoE-/-小鼠主動(dòng)脈根部橫切面動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積。
　　[結(jié)果]
　　酶聯(lián)免疫法結(jié)果顯示IL-6受體阻滯劑Tocilizumab顯著降低apoE-/-小鼠血漿C反應(yīng)蛋白、TNFα和IL-1β水平,提高IL-10水平;血脂檢測(cè)發(fā)現(xiàn)tocilizumab處理組apoE-/-小鼠血漿中的HDL–C、和apoA-I水平升高,而TG、TC水平降低;實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示tocili

5、zumab增加apoE-/-小鼠主動(dòng)脈、肝臟及小腸ABCA1和ABCG1基因表達(dá);Western印跡法結(jié)果提示tocilizumab增加apoE-/-小鼠主動(dòng)脈、肝臟及小腸ABCA1蛋白質(zhì)的表達(dá)。油紅O染色結(jié)果顯示tocilizumab減輕主動(dòng)脈根部橫截面的動(dòng)脈粥樣硬化病變。
　　[結(jié)論]
　　IL-6受體阻滯劑tocilizumab能夠抑制apoE-/-小鼠體內(nèi)炎癥因子CRP、TNFα和IL-1β的表達(dá),增加主動(dòng)脈、肝臟及