柿單寧特征二聚體穩(wěn)定性及其抑制3T3-L1細(xì)胞分化的活性形式探究.pdf

1、前期研究發(fā)現(xiàn)，柿單寧具有良好的抑制3T3-L1細(xì)胞成脂分化的能力，且柿單寧特征二聚體中A型連接ECG二聚體和A型連接ECGC二聚體是其主要有效成分，但是其在細(xì)胞模型中又極其不穩(wěn)定。因此研究柿單寧特征二聚體A型連接ECG二聚體和A型連接ECGC二聚體在3T3-L1細(xì)胞體系中穩(wěn)定性與其抑制3T3-L1細(xì)胞成脂分化的能力非常具有必要性。鑒于細(xì)胞體系復(fù)雜性，本研究首先研究了二聚體在細(xì)胞培養(yǎng)基體系中的穩(wěn)定性及代謝產(chǎn)物。隨后又研究了其在細(xì)胞體系中穩(wěn)

2、定性及其在細(xì)胞中分布。最后進(jìn)行了兩種A型連接的二聚體抑制3T3-L1成脂分化的結(jié)構(gòu)形式探究。主要研究結(jié)果如下。
　　1.柿單寧特征二聚體在細(xì)胞培養(yǎng)基中穩(wěn)定性
　　柿單寧特征四種特征二聚體穩(wěn)定性B型連接EC二聚體＞A型連接EC二聚體＞A型連接ECG二聚體＞A型連接EGCG二聚體。伴隨著四種二聚體在培養(yǎng)液中降解，均能產(chǎn)生一系列產(chǎn)物和H2O2，產(chǎn)生的H2O2量和代謝速率正相關(guān)。其中A型連接EC產(chǎn)生一種三聚體和兩種同分異構(gòu)。B型EC

3、產(chǎn)生兩種m/z665的同分異構(gòu)。A型ECG產(chǎn)生沒食子酸。A型EGCG產(chǎn)生沒食子酸及分子離子峰為m/z469.7、m/z905.9及m/z452.8產(chǎn)物。
　　2.柿單寧特征二聚體在3T3-L1細(xì)胞體系中穩(wěn)定性
　　柿單寧特征四種特征二聚體穩(wěn)定性B型連接EC二聚體＞A型連接ECG二聚體＞A型EC二聚體＞A型連接EGCG二聚體。四種二聚體在培養(yǎng)液中降解均產(chǎn)生H2O2但是均少于在純培養(yǎng)液中，產(chǎn)生的H2O2量和代謝速率正相關(guān)。在3T

4、3-L1細(xì)胞中未發(fā)現(xiàn)任何二聚體及其產(chǎn)物。細(xì)胞膜上總酚A型連接ECG二聚體＞A型連接EC二聚體＞A型連接EGCG二聚體＞B型連接EC二聚體。說(shuō)明二聚體抑制3T3-L1細(xì)胞成脂分化可能是通過(guò)與細(xì)胞膜結(jié)合完成。
　　3.兩種A型連接的二聚體抑制3T3-L1成脂分化的結(jié)構(gòu)形式探究
　　SOD，VC均能極大提高A型連接ECG二聚體和A型連接ECGC二聚體在細(xì)胞體系的穩(wěn)定。VC可以顯著提高A型連接ECG抑制3T3-L1細(xì)胞成脂分化效果。