胎球蛋白A對3T3-L1脂肪細(xì)胞的增殖、分化及脂肪細(xì)胞因子的影響.pdf

1、胰島素抵抗（insulin resistance，IR）被認(rèn)為是滋生糖尿病、肥胖癥、冠心病、高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化等多種代謝性疾病的“共同土壤”。 IR 是逐漸增加的心血管疾病的主要危險(xiǎn)因素，研究表明多項(xiàng)機(jī)制參與了這一病理過程，其中胎球蛋白的作用越來越被受到重視。胎球蛋白A（Fetuin-a）是一種在哺乳動(dòng)物的血清中含量豐富的糖蛋白。成年人主要由肝臟分泌。Fetuin-a 被認(rèn)為是內(nèi)源性的胰島素刺激的胰島素受體酪氨酸磷酸化的天然的

2、抑制劑。臨床資料血清Fetuin-a 高水平與糖尿病、IR、代謝綜合征相關(guān)?；蚯贸男∈笠葝u素敏感性得到改善，且抵抗高脂飲食的致肥胖作用，遺傳學(xué)研究報(bào)道人胎球蛋白基因的單核苷酸多態(tài)性與不僅與Ⅱ型糖尿病的發(fā)生有關(guān)，還會(huì)影響胰島素對脂肪細(xì)胞的脂肪生成和脂解的作用,提示Fetuin-a 還可能通過影響與脂肪組織間接參與全身的IR。 目的：觀察Fetuin-a 對體外培養(yǎng)的3T3-L1 前脂肪細(xì)胞增殖、分化、分泌細(xì)胞因子的影響。

3、 方法：體外培養(yǎng)小鼠3T3-L1 前脂肪細(xì)胞，以MTT 法檢測3T3-L1 前脂肪細(xì)胞的增殖；油紅O 染色并通過比色定量分析檢測細(xì)胞分化過程中胞漿脂質(zhì)的聚積情況；熒光實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time PCR)檢測脂肪細(xì)胞關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子過氧化物體增殖劑活化受體?(peroxisome proliferatoractivated receptor，PPAR?) 及脂肪細(xì)胞因子脂聯(lián)素(adiponectin,APN)mRNA的表達(dá)差異，及

4、炎性因子腫瘤壞死因子-a（TNF-a）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）mRNA的表達(dá)差異。 結(jié)果： 1.3T3-Ll 前脂肪細(xì)胞在分化過程中細(xì)胞體積逐漸增大，脂滴逐漸增多，Real-time PCR 結(jié)果顯示3T3-L1 前脂肪細(xì)胞基本不表達(dá)PPAR?、APN，在分化過程中這兩種基因表達(dá)逐漸上調(diào)，標(biāo)志脂肪細(xì)胞分化成熟。 2.不同濃度的Fetuin-a 在干預(yù)3T3-L1 前脂肪細(xì)胞48h 后明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖，且呈劑量

5、依賴性，與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。10μMFetuin-a 對3T3-L1 前脂肪細(xì)胞分化過程脂質(zhì)聚集無明顯影響(P﹥0.05)，但能明顯促進(jìn)PPAR?和APN mRNA的表達(dá)，分別為對照組的2.96±0.553，1.68±0.377 倍，P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.10μM Fetuin-a 干預(yù)3T3-L1 脂肪細(xì)胞24h、48h 后，APN mRNA 表達(dá)明顯下降，分別為對照組的0.732±0.08