胰腺癌中ABCG2和P-gp的表達和意義.pdf

1、胰腺癌是預(yù)后最差的腫瘤之一,與腫瘤多藥耐藥和腫瘤干細胞有關(guān),腫瘤干細胞特性之一的SP表型主要與ABCG2的有關(guān),ABCG2與P-gp同屬于ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白超家族成員。由于ABCG2和P-gp有類似藥理學(xué)功能,在正常組織器官中分布相似,并且兩者在腫瘤中表達與缺氧等腫瘤微環(huán)境相關(guān),所以本研究將對胰腺癌中此兩種蛋白與臨床特征之間及兩種蛋白間相關(guān)性進行研究,以推測兩者是否存在相同蛋白表達調(diào)控途徑。
　　 本研究采用免疫組織化學(xué)的SP

2、法檢測ABCG2和P-gp在胰腺癌細胞中表達,用統(tǒng)計學(xué)方法分析ABCG2和P-gp二者表達有無相關(guān)性及其在胰腺癌細胞中的表達與腫瘤大小、手術(shù)病理分期、病理組織分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨床病理因素之間的關(guān)系。
　　 實驗方法
　　 1、病例和標本
　　 選取中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院普外科2006年-2009年手術(shù)切除的胰腺腫瘤和十二指腸乳頭癌及十二指腸癌(均未侵犯胰腺)手術(shù)切除的正常胰腺石蠟組織標本。所有標本均有詳細臨床

3、資料,均為初發(fā)病例,手術(shù)前未接受放療、化療等抗腫瘤治療。胰腺癌組共67例,取自十二指腸乳頭癌和十二指腸癌癌腫均未侵犯胰腺組織的手術(shù)切除的正常胰腺12例。
　　 2、試劑
　　 ABCG2單克隆抗體購自美國santa公司,P-gp單克隆抗體和通用型S-P免疫組化染色試劑盒,購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司,DAB顯色試劑盒,購自北京中衫金橋生物技術(shù)有限公司。
　　 3、方法
　　 制作胰腺癌組織芯片。采用免

4、疫組化SP法,嚴格按照SP檢測試劑盒說明書所示步驟進行,切片經(jīng)乙二胺四乙酸緩沖液(PH=9.0)高壓熱修復(fù)預(yù)處理。
　　 4、結(jié)果判定
　　 ABCG2和P-gp均以胞膜和胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒判定為顯色,選取5個高倍鏡視野(X 400)作陽性細胞計數(shù),以陽性細胞數(shù)≤5％為陰性,>5％為陽性。
　　 5、統(tǒng)計方法分析
　　 采用SPSS 17.0軟件進行數(shù)據(jù)分析,率的比較采用卡方檢驗；ABCG2和P-gp表達

5、的相關(guān)性采用Spearman秩和相關(guān)分析,P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義,所有檢驗的P值均為雙側(cè)。
　　 結(jié)果：
　　 1、ABCG2蛋白陽性表達位于腫瘤細胞胞膜和細胞質(zhì),未見核膜陽性表達。ABCG2陽性42例(62.7％),陰性25例(37.3％)。P-gp陽性表達位于腫瘤細胞胞膜和細胞質(zhì)。P-gp的陽性54例(80.6％),P-gp陰性表達13例(19.4％)。ABCG2和P-gp于正常胰腺12例均為陰性表達。
　　

6、 2、ABCG2與腫塊大小(r=0.305,p=0.012)呈正相關(guān),與腫瘤分化(r=-0.325,p=0.014)呈負相關(guān),有統(tǒng)計學(xué)差異,與臨床分期,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)。P-gp 與腫塊大小臨床分期、腫瘤分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)(P>0.05)
　　 3、ABCG2與p-gp的表達經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析為正相關(guān)r=0.246,P為0.045<0.05。
　　 結(jié)論：
　　 1、胰腺癌ABCG2表達陽性細胞可視為腫瘤干細胞研