LOX-1在2型糖尿病大血管病變中的表達(dá)及普羅布考的干預(yù)作用.pdf

1、目的：凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)是血管內(nèi)皮細(xì)胞表面氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的主要受體，通過增加ox-LDL介導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂，引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化。本研究的主要目的如下： (1)探尋簡單、經(jīng)濟(jì)、成功率高的2型糖尿病造模方法； (2)觀察LOX-1在2型糖尿病大鼠大血管早期病變中的表達(dá)及其表達(dá)的影響因素； (3)分析普羅布考對(duì)2型糖尿病大鼠大血管病變處LOX-1 表達(dá)的影響及其影響

2、機(jī)制。 方法： 健康的SD雄性大鼠50只，隨機(jī)分成四組：D組(正常對(duì)照組，10只，普通飼料)，A組(高糖高脂飲食8周后加小劑量STZ誘導(dǎo)2型糖尿病模型成功后加普羅布考500mg/kg/d干預(yù)8周組，13只)，B組(開始高糖高脂飲食時(shí)即加普羅布考500mg/kg/d干預(yù)8周后加小劑量STZ誘導(dǎo)2型糖尿病模型成功后繼續(xù)給予普羅布考500mg/kg/d干預(yù)8周組，13只)，C組(高糖高脂飲食8周后加小劑量STZ誘導(dǎo)2型糖尿病模

3、型成功后8周組，14只)。隨機(jī)分組后，給予A、B、C組高糖高脂飲食，6周后按1ml/100mg體重給予脂肪乳灌胃，第8周末測(cè)定血清胰島素，計(jì)算并比較正常組與高糖高脂飲食組(即A、B、C組)胰島素結(jié)果，顯示高糖高脂飲食組胰島素明顯高于正常對(duì)照組。遂于次日清晨稱取動(dòng)物體重，按30mg/kg體重尾靜脈注射STZ，3日后再次稱量動(dòng)物體重，按30mg/kg體重第二次尾靜脈注射STZ。然后于第二次注射后一周經(jīng)尾靜脈測(cè)定血糖，血糖測(cè)定結(jié)果大于16.7

4、mmol/l 為2型糖尿病造模成功。造模后繼續(xù)高糖高脂飲食飼養(yǎng)8周后處死，取血測(cè)定血清胰島素及血脂，取大鼠主動(dòng)脈冰凍切片測(cè)定原位活性氧(ROS)產(chǎn)量，RT-PCR 和 Westrn blot 測(cè)定 LOX-1表達(dá)量。所得數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。 結(jié)果： 高糖高脂飲食8周后，A、B、C組血清胰島素明顯高于D組(p=0.000)，STZ 誘導(dǎo)后A、B、C組2型糖尿病的成功率為91.67％。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，A、B、C組

5、大鼠的血清TG、TC、LDL-C 水平均明顯高于D組(p=0.000；p=0.000：p=0.000；p=0.000)，其中A組和B組的血清TC 和 LDL-C水平均明顯低于C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05：p<0.05)，A組和B組的血清TC和LDL-C水平之間的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。C組大鼠主動(dòng)脈出現(xiàn)早期的血管病變，A組和C組幾乎無病變。各組大鼠主動(dòng)脈原位ROS檢測(cè)結(jié)果顯示，C組ROS熒光強(qiáng)度最強(qiáng)，A、B組次之，D組

6、最弱。與D組相比，A、B、C組大鼠主動(dòng)脈血管組織LOX-1 的 mRNA 表達(dá)水平和蛋白水平均明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.000；p=0.000)，A、B兩個(gè)干預(yù)組的主動(dòng)脈血管組織LOX-1的mRNA表達(dá)水平和蛋白水平明顯低于C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05：p<0.05)，A組和B 組之間比較，LOX-1mRNA 表達(dá)水平和蛋白水平的差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。 結(jié)論： (1)高糖高脂飲食加小劑量多