C1QBP、高糖基化hCG在人外周血的測(cè)定及其與絨癌耐藥關(guān)系的研究.pdf

1、背景及目的：
　　 絨癌是發(fā)生于育齡婦女的高度惡性腫瘤，化療是其主要的治療方式：然而化療耐藥已成為絨癌治療失敗的主要原因之一，因此，探討絨癌的耐藥機(jī)制對(duì)于制定針對(duì)性的治療方案，改善耐藥患者的預(yù)后具有重要的臨床意義。
　　 C1QBP，即補(bǔ)體成分1Q亞補(bǔ)體結(jié)合蛋白，為本課題研究的重點(diǎn)之一。本課題組前期從細(xì)胞學(xué)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中均證實(shí)其可能與惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤耐藥相關(guān)，表現(xiàn)為(1)絨癌耐藥細(xì)胞株中C1QBP水平較親本株均明顯上調(diào)(2

2、)使C1QBP沉默表達(dá)后，結(jié)果其IC50和RI明顯降低，出現(xiàn)耐藥性逆轉(zhuǎn)；C1QBP基因敲除組裸鼠皮下移植瘤，成瘤時(shí)間長(zhǎng)，腫瘤體積及重量明顯受抑制，同劑量化療藥物(VP16)對(duì)腫瘤抑制率較對(duì)照組明顯升高。以上結(jié)論均提示C1QBP很可能與絨癌耐藥相關(guān)。本次實(shí)驗(yàn)第一部分?jǐn)M測(cè)定不同人群血清中C1QBP的水平并研究其與GTN耐藥的關(guān)系。
　　 hCG的一個(gè)相關(guān)分子——高糖基化hCG已成為近幾年滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。國(guó)外早有文獻(xiàn)表明高

3、糖基化hCG可以取代β-hCG成為滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的特異性標(biāo)志物，但國(guó)內(nèi)關(guān)于此類的研究幾乎為空白。本實(shí)驗(yàn)第二部分?jǐn)M測(cè)定人血清中高糖基化hCG的水平、所占總hCG比例并探討其與GTN耐藥的關(guān)系。
　　 研究方法：
　　 1．研究對(duì)象：連續(xù)入選于2011年6月至2012年4月期間在北京協(xié)和醫(yī)院體檢及就診的健康婦女、正常妊娠婦女和滋養(yǎng)細(xì)胞疾病患者。
　　 2．標(biāo)本及臨床資料收集：全部GTN患者及正常妊娠婦女標(biāo)本來自北京協(xié)和

4、醫(yī)院進(jìn)行血清β-hCG檢測(cè)的剩余血清，健康婦女來自檢驗(yàn)科生化檢查后剩余的血清。48h之內(nèi)將血清樣本分裝到0.6mLEP管中，轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱凍存。同時(shí)詳細(xì)記錄同一樣本的血清β-hCG水平以及所有對(duì)象相應(yīng)的臨床資料。
　　 3．檢測(cè)上述樣本外周血清C1QBP、H-hCG的濃度。二者均采用ELISA試劑盒檢測(cè)。
　　 4．采用回顧性分析的方法，分析C1QBP、H-hCG在不同人群血清中的表達(dá)水平，并分析他們各生物學(xué)變量及化

5、療耐藥的相關(guān)性。
　　 5．采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。樣本的正態(tài)性分布利用Shapiro-Wilk檢驗(yàn)；兩組正態(tài)分布獨(dú)立樣本比較采用t檢驗(yàn)；兩組非正態(tài)分布獨(dú)立樣本利用Mann-Whitney非參數(shù)檢驗(yàn)；多組非正態(tài)分布獨(dú)立樣本比較利用ANOVA非參數(shù)檢驗(yàn)，組間兩兩比較用LSD-t法檢驗(yàn)，P＜0.05（雙側(cè)）有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 1．(1)C1QBP在健康婦女和GTN患者血清中均可測(cè)得

6、，其中健康婦女為25.16±10.93μg/L，GTN患者為29.35±9.97μg/L，健康婦女與GTN患者間無顯著性差異(P=0.051)(2)在耐藥血清中C1QBP的水平(38.54±9.17μg/L)高于敏感血清(26.72±8.47μg/L)、治愈血清(25.53±6.49μg/L)和健康婦女(25.16±10.93μg/L)(P=0.000，0.000，0.000)，敏感與治愈、治愈與健康婦女、健康婦女與敏感血清中無差異(P

7、=0.474，0.876，0.437)(3)患者耐藥前血清中C1QBP的水平高于敏感前血清，有顯著性差異(P=0.001)(4)不同耐藥方案、不同部位的耐藥病灶之間C1QBP的水平無明顯差異(P=0.189，0.294)(5)分別對(duì)比是否化療、化療前后、停藥10天以內(nèi)/以上的血清C1QBP水平，無顯著性差異(P=0.442，0.421，0.159)(6)在敏感血清中，從未耐藥和曾經(jīng)耐藥的血清之間無明顯差異(P=0.967)。
　　

8、 2．(1)在正常妊娠婦女中，H-hCG占總hCG的比例在孕期8周以內(nèi)(22.09±20.57％)與8周以上(11.86±13.55%)無顯著性差異(P=0.317)。(2)不同人群中H-hCG占總hCG的比例，敏感血清(74.6±32.9%)遠(yuǎn)高于絨癌耐藥血清(12.8±11.1%)和正常妊娠婦女(22.09±20.57%)(P=0.000，0.000)，而耐藥血清與正常妊娠婦女之間無顯著差異(P=0.594)。
　　 結(jié)論

9、：
　　 1．(1)C1QBP在健康婦女、GTN患者中無顯著差異。(2)GTN耐藥血清中C1QBP的水平遠(yuǎn)高于敏感血清和治愈血清，提示C1QBP可能與GTN耐藥有一定關(guān)系。(3)C1QBP有可能參與或?qū)е铝私q癌的化療耐藥，為今后逆轉(zhuǎn)耐藥的治療提供了新的思路。而與不同的化療方案和不同部位耐藥病灶之間無明顯相關(guān)性。(4)人血清中的C1QBP不隨化療的刺激和停止而變化。亦不會(huì)持續(xù)高水平存在于耐藥患者體內(nèi)。證實(shí)其作為絨癌耐藥標(biāo)記物比較可