中國甜柿‘鄂柿1號’自然和40℃溫水脫澀前后差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析.pdf

1、‘鄂柿1號’是在湖北省大別山區(qū)發(fā)現(xiàn)的一個中國原產(chǎn)完全甜柿(“中國甜柿”或C-PCNA)新種質(zhì)。該品種果實大，種子少，栽培價值高于‘羅田甜柿’，但其自然脫澀特點和機理研究鮮有報道。本研究以中國甜柿‘鄂柿1號’為主要試材，以中國甜柿‘羅田甜柿’、日本甜柿(“日本原產(chǎn)完全甜柿”或J-PCNA)‘陽豐’和非完全甜柿‘磨盤柿’為對照，通過檢測自然及40℃溫水脫澀處理前后果實可溶性單寧含量變化，同時利用iTRAQ技術(shù)分析其蛋白組學(xué)差異，以期探討中國

2、甜柿‘鄂柿1號’自然脫澀特點及其可能的分子機理。主要研究結(jié)果如下:
　　1.四個柿品種不同時期單寧變化各不相同，‘羅田甜柿’、‘鄂柿1號’自然脫澀主要集中在20 WAF至25 WAF，遠(yuǎn)遠(yuǎn)晚于‘陽豐’(10 WAF)?！_田甜柿’、‘鄂柿1號’在10 WAF至15 WAF期間不溶性單寧含量相對前期迅速上升，且此時可溶性單寧含量下降，進(jìn)一步驗證‘鄂柿1號’自然脫澀既有“稀釋效應(yīng)”又存在“凝固效應(yīng)”。
　　2.‘鄂柿1號’果實不

3、同處理條件下可溶性單寧含量變化不同，40℃溫水處理使柿果在處理12h后基本完成脫澀。且不可溶性單寧含量升高與可溶性單寧含量直線下降時期相對應(yīng)。因此，初步推測‘鄂柿1號’40℃溫水處理過程中亦存在“凝固效應(yīng)”。
　　3.通過iTRAQ技術(shù)共鑒定到4954個蛋白質(zhì)類別數(shù)(protein group)，2段以上不同肽段（uniquepeptide）覆蓋的蛋白3041個，占全部蛋白的61.37％。其蛋白質(zhì)分子量10-70 kDa;等電點4

4、.7-7.4和7.9-9.5。以(F10)為內(nèi)參，差異倍數(shù)為1.2為標(biāo)準(zhǔn)對所鑒定4954個蛋白質(zhì)進(jìn)行篩選，獲得約500個差異蛋白。
　　4.生物信息學(xué)分析結(jié)果表明在‘鄂柿1號’自然脫澀與人工脫澀過程中均涉及一些與能量代謝相關(guān)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上蛋白質(zhì)加工的代謝途徑、與果實成熟、響應(yīng)刺激相關(guān)等代謝途徑。自然脫澀情況下主要涉及類黃酮合成，苯丙烷合成途徑的下調(diào)表達(dá)，ABC轉(zhuǎn)運模型，木質(zhì)素代謝途徑上調(diào)表達(dá);而人工脫澀情況下主要是各種應(yīng)