蛋白質(zhì)組學(xué)篩選動脈硬化閉塞癥相關(guān)蛋白的研究.pdf

1、動脈粥樣硬化閉塞癥(Atherosclerosis Obliterans,ASO)是全身動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)在外周動脈中的表現(xiàn)，是血管外科的常見病之一。以血管壁內(nèi)脂質(zhì)異常沉積、炎癥細(xì)胞浸潤、泡沫細(xì)胞形成、平滑肌細(xì)胞增殖和遷移、粥樣斑塊形成為病理特征，是基因和環(huán)境相互作用的結(jié)果，但確切的發(fā)病機(jī)制尚未明確。
　　 基因是遺傳信息的攜帶者，但是真正體現(xiàn)生物體功能的是蛋白質(zhì)，并且基因組與蛋白質(zhì)組之間是不一

2、致的，因此，應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法直接研究ASO的蛋白表達(dá)情況，可能更有助于揭示ASO的發(fā)病機(jī)制。隨著蛋白質(zhì)組學(xué)及相關(guān)分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)對動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制開始了蛋白質(zhì)組學(xué)的研究。但尚未檢索到有關(guān)人ASO病變股動脈的蛋白質(zhì)組學(xué)研究。
　　 研究目的：研究ASO病變股動脈蛋白質(zhì)組表達(dá)情況，探討病變股動脈表達(dá)的差異蛋白質(zhì)及其在發(fā)病機(jī)制中的作用，并對差異蛋白質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。
　　 方法：首先，選取人ASO股動脈

3、8例及正常股動脈5例，行HE染色，以提供形態(tài)學(xué)依據(jù)；然后，提取組織蛋白質(zhì)，行雙向凝膠電泳分離，質(zhì)譜鑒定及數(shù)據(jù)庫查詢，獲得差異蛋白質(zhì)信息。最后，運(yùn)用免疫組化和western-blot對差異蛋白質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。
　　 結(jié)果：ASO組股動脈符合AS病理特征，正常組股動脈無病理變化；成功建立ASO和正常股動脈雙向電泳圖譜，并篩選出表達(dá)量差異大于2倍以上的蛋白質(zhì)點(diǎn)53個(gè)，27個(gè)上調(diào)，26個(gè)下調(diào)，質(zhì)譜鑒定出24種蛋白質(zhì)，主要與炎癥、免疫、氧化應(yīng)