SELDI蛋白芯片技術在篩選中草藥靶點中的應用.pdf

1、蛋白質組學是21 世紀整體細胞生物學新的、最重要的內容，將為醫(yī)藥、農業(yè)和工業(yè)的革新提供嶄新的思路。蛋白質組相關的課題成為近年來醫(yī)學分子生物學領域非?；钴S的研究方向。在對人類蛋白質組的研究方面，當前主要圍繞于特異的組織、細胞和疾病上，通過比較研究體系內不同狀態(tài)(如不同生長發(fā)育時期、給藥前后、生理與病理狀態(tài))的蛋白質表達圖譜，定量分析各蛋白質的變化，從而可以對不同體系(組織、細胞、體液等)內復雜代謝、調控等生物功能進行動態(tài)監(jiān)測。以蛋白質組為

2、研究手段，分析疾病與治療之間的定量關系，正在成為臨床診斷與治療的新的發(fā)展方向。 蛋白質組學作為高通量平行篩選技術在理論體系上與中醫(yī)藥的整體觀、辨證觀、動態(tài)觀非常相似，尤其是作為某一階段病理變化概況的中醫(yī)的“證”，可能與機體在某一特定環(huán)境下所表達的蛋白質組存在內在必然聯(lián)系。把中醫(yī)的證當作疾病一定階段某一特定狀態(tài)下表達的蛋白質組功能的總和并沒有牽強附會。中醫(yī)學認為“證”包括了疾病處于某一階段病因、病性、病位、病勢等病理要素，是機體內

3、外因素綜合作用的反應，隨著疾病的病程不同而相應發(fā)生變化。同一疾病證候不一，可以認為同一疾病不同階段或在不同個體身上的功能基因組的表達譜——功能蛋白質組不一樣，證候產生的物質基礎可能就反映在蛋白質組水平上。因為疾病表現(xiàn)出來的癥狀和體征具有其分子基礎，這些表現(xiàn)型的實質是功能基因組及其在mRNA、功能蛋白質組水平差異的外在表現(xiàn)，故“證”的本質可以認為是疾病個體基因型及其表達結果一蛋白質組。通過蛋白質組學技術，比較復方、各種組合的拆方作用后蛋白

4、質表達的差異，進而確定不同配伍對應的基因靶點與功能蛋白質。這不但有利于闡明方藥作用的物質基礎及處方配伍的內在規(guī)律，而且還可以在治療層面上反過來再認識“證”的實質。 SELDI 技術經美國賽弗吉生物系統(tǒng)公司(Ciphergfen Biosystems，Inc，F(xiàn)remont，CA，USA) 研發(fā)和商品化而形成SELDI-TOF-MS，亦常稱作蛋白質指紋技術或飛行質譜技術。SELDI-TOF-MS 為最近幾年發(fā)展起來的一種新的蛋白質

5、組研究方法，其以基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜 (matrix-assisted laser desorption ionization time offlight mass spectrometry， MALDI-TOF-MS) 為基礎并進行改進，融合了質譜和芯片兩大技術的特色和優(yōu)勢。蛋白質芯片技術結合蛋白組學用于腫瘤研究已經發(fā)現(xiàn)了一系列新的腫瘤特異性生物標志物，包括前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、胃腸道腫瘤等，同時在腫瘤的發(fā)病機制方面也

6、取得了一些新的進展。另中藥進入人體發(fā)揮作用的最終環(huán)節(jié)大多是藥物分子與蛋白質的反應。通過對蛋白質組的研究尋找不良相關蛋白；研究藥靶、分子藥理、毒理機制。SELDI-TOF-MS 能靈敏的檢測到中藥用藥前后機體蛋白質組表達的變化，從而能快速發(fā)現(xiàn)對藥物敏感的機體蛋白或發(fā)現(xiàn)新的藥靶分子。該實驗以中草藥魚腥草注射液為例，實驗動物(狗)為研究對象結果表明：注射魚腥草的狗(留取給藥 1-9 天的血清)與注射NS的狗(均留取給藥1-7天的血清)相比，檢