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1、目的:Graves病是內(nèi)分泌系統(tǒng)常見(jiàn)的一種器官特異性自身免疫疾病,中國(guó)女性中的發(fā)病率達(dá)到約2%,尚無(wú)有效的治療方案,其確切的發(fā)病機(jī)制至今還不十分清楚.本課題旨在篩選中國(guó)女性Graves病甲狀腺組織和正常甲狀腺組織差異性高表達(dá)的基因,為闡明Graves病發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)理,為研制新的靶向藥物及基因診斷、基因治療提供新的理論指導(dǎo).方法:以中國(guó)女性Graves病患者甲狀腺組織mRNA作為檢測(cè)子(Tester),正常女性甲狀腺mRNA作為驅(qū)動(dòng)
2、子(Driver)進(jìn)行正向抑制性消減雜交(suppression subtractive hybridization,SSH)操作,篩選構(gòu)建中國(guó)女性Graves病甲狀腺組織和正常甲狀腺組織差異性高表達(dá)的正向消減cDNA片段文庫(kù).藍(lán)/白初步篩選重組克隆,PCR擴(kuò)增插入片段后,進(jìn)行DNA測(cè)序.通過(guò)Genbank,應(yīng)用Blast軟件對(duì)獲得的EST序列進(jìn)行同源性分析,并利用PubMed對(duì)序列進(jìn)行相關(guān)的初步生物信息學(xué)分析.結(jié)論:1.應(yīng)用抑制性消減
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