BACE-1在APP-Ps-1轉(zhuǎn)基因小鼠視網(wǎng)膜和腦中的表達(dá).pdf

1、阿爾茨海默病，又稱老年癡呆，是一種常發(fā)于老年人群中的、不可逆性的神經(jīng)退行性疾病，患者記憶思維能力減退并最終導(dǎo)致癡呆。由于缺少有效的早期觀察指標(biāo)，該疾病一旦得到確診便已經(jīng)進(jìn)入臨床發(fā)病期，因此尋找早期的診斷指標(biāo)具有重要意義。研究表明，老年斑(SP)和神經(jīng)元纖維纏結(jié)(NFT)是老年性癡呆的特征性病變，在病變發(fā)生的過程中，Aβ異常沉積起到核心作用，而BACE-1是Aβ形成的過程中重要的限速酶。以往研究顯示，老年癡呆不僅會導(dǎo)致患者腦組織發(fā)生病變，

2、而且常常累及視網(wǎng)膜。因此，本實(shí)驗(yàn)以易于觀察和干擾處理的視網(wǎng)膜為窗口，以BACE-1為切入點(diǎn)，研究其在視網(wǎng)膜與腦中的表達(dá)變化情況，以期為該疾病早期觀察指標(biāo)的研究提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)采用3月齡、6月齡、8月齡的APP/PS-1轉(zhuǎn)基因小鼠作為實(shí)驗(yàn)組，等月齡C57/BL6野生小鼠作為對照組，分別通過Morris水迷宮比較觀察各組小鼠行為學(xué)改變;尼氏染色觀察視網(wǎng)膜的結(jié)構(gòu)層次和節(jié)細(xì)胞層陽性細(xì)胞數(shù)的;免疫組織化學(xué)技術(shù)的方法檢測腦與視網(wǎng)膜中BAC

3、E-1的表達(dá)情況。結(jié)果如下:
　　1) Morris水迷宮檢測:
　　在學(xué)習(xí)階段，各月齡野生組小鼠的逃避潛伏期沒有明顯差異;6月齡、8月齡轉(zhuǎn)基因組小鼠在day3、day4的潛伏期時(shí)間較3月齡組明顯延長，6月齡轉(zhuǎn)基因組小鼠較等月齡野生組小鼠在day3、day4的逃避潛伏期延長，8月齡轉(zhuǎn)基因組小鼠在day2、day3、day4的逃避潛伏期較等月齡野生組小鼠延長。
　　在記憶測試中，各月齡野生組小鼠穿越平臺區(qū)域次數(shù)無明顯差異

4、;6月齡、8月齡轉(zhuǎn)基因組小鼠穿越平臺區(qū)域次數(shù)較等月齡野生組和3月齡轉(zhuǎn)基因組小鼠顯著減少。這些提示APP/PS-1轉(zhuǎn)基因小鼠在6月齡時(shí)出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶功能減退。
　　2) BACE-1表達(dá)變化:
　　在腦內(nèi)，BACE-1廣泛表達(dá)于野生組和轉(zhuǎn)基因組小鼠海馬和皮質(zhì)。各月齡野生組及3月齡轉(zhuǎn)基因組未見BACE-1斑塊出現(xiàn)，但6月齡和8月齡的轉(zhuǎn)基因組小鼠內(nèi)嗅皮質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)和額項(xiàng)皮質(zhì)區(qū)均出現(xiàn) BACE-1斑塊。
　　在視網(wǎng)膜，3月齡野生

5、組小鼠視網(wǎng)膜未見明顯BACE-1陽性產(chǎn)物表達(dá)，6月齡及8月齡野生組小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)層以及外網(wǎng)層略有表達(dá)。與同月齡的野生組小鼠相比，3月齡轉(zhuǎn)基因組小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層的BACE-1表達(dá)明顯增加。6月齡、8月齡時(shí)視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)層、外網(wǎng)層BACE-1表達(dá)有顯著增強(qiáng)。
　　3)尼氏染色:各組小鼠視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)層次清晰，尼氏小體無明顯碎裂溶解，節(jié)細(xì)胞層陽性細(xì)胞數(shù)目及形態(tài)無明顯改變。
　　這些結(jié)果提示BACE-1在轉(zhuǎn)基因組小鼠視