2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:研究間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的輸注是否可以減輕系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)小鼠的自身免疫反應(yīng),改善其免疫損傷,并探討MSC治療SLE機(jī)制。
   方法:⑴分離大鼠骨髓MSC:分離雄性SD大鼠(80g)股骨、脛骨,采用全骨髓培養(yǎng)法分離、擴(kuò)增、傳代、凍存、復(fù)蘇MSC,并描繪MSC生長(zhǎng)曲線。⑵動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組:將雌性MRL/mp(fas)lpr小鼠隨機(jī)分為2組,每組5只,試驗(yàn)組:在14周齡時(shí)尾靜脈輸注MSC(0.3×106/0.15ml.

2、只);對(duì)照組:以生理鹽水代替MSC作尾靜脈輸注。⑶實(shí)驗(yàn)持續(xù)8周,進(jìn)行下列指標(biāo)觀察:①每天觀察小鼠一般情況:進(jìn)食、精神、毛發(fā)、體重、存活時(shí)間直至處死。②每3天收集小鼠尿液,行bradrord法尿蛋白濃度測(cè)定。③每周剪尾采血50 ul,分離血清,放射免疫法測(cè)血清抗ds-DNA抗體濃度。④小鼠22周齡時(shí)切取腎臟作病理切片檢查,觀察狼瘡性腎炎腎癥病理改變,同時(shí)作免疫復(fù)合物免疫組織化學(xué)檢查。⑤流式細(xì)胞術(shù)測(cè)外周血、脾臟、胸腺CD4+CD25+T細(xì)胞

3、水平。
   結(jié)果:⑴采用全骨髓培養(yǎng)法,7-10天后細(xì)胞可鋪滿培養(yǎng)瓶底85-95%,傳至第2、3代后收集細(xì)胞,生長(zhǎng)曲線示原代至3代的MSC生長(zhǎng)狀態(tài)較好。⑵尾靜脈輸注后,小鼠局部、整體無不良反應(yīng)。3)在實(shí)驗(yàn)觀察的8周時(shí)間內(nèi):①2組小鼠均存活8周直至處死,進(jìn)食、精神狀態(tài)、活動(dòng)度、體重、毛發(fā)大致相同。②實(shí)驗(yàn)前兩組尿蛋白濃度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);MSC輸注組,尿蛋白濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.05);③MSC輸注組,血清抗ds-

4、DNA抗體濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。④腎臟病理HE染色觀察:MSC輸注組小鼠間質(zhì)性腎炎病理改變較對(duì)照組小鼠減輕。腎臟病理免疫組化染色觀察:MSC輸注組小鼠的腎小球系膜區(qū)免疫復(fù)合物沉積量減少,范圍縮小呈點(diǎn)狀分布;對(duì)照組小鼠的腎小球系膜區(qū)免疫復(fù)合物沉積量較多,范圍較大呈片狀分布,兩組有顯著性差異(P<0.05)。⑤試驗(yàn)組外周血、胸腺中CD4+CD25+T細(xì)胞水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05);試驗(yàn)組脾臟CD4+CD25+T細(xì)胞略高

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