帕金森病小鼠黑質Bax蛋白表達和細胞凋亡及煙酰胺干預作用的研究.pdf

1、中文摘要前言帕金森病(ParkinsonsDiseasePD)是一種常見于老年人的中樞神經系統(tǒng)退行性疾病，主要病理特征為黑質紋狀體系統(tǒng)多巴胺(DA)能神經元進行性死亡、缺失。近年來許多研究揭示了PD的細胞凋亡證據，認為PD與DA能神經元凋亡過度有關。Bel一2家族是目前研究得較為深人的與凋亡密切相關的基因。其中Bel2可抑制多種原因所致的細胞凋亡。Bax是Bel一2的同源蛋白，可以促進細胞凋亡。1一甲基一4一苯基一1236一四氫毗吮(M

2、PTP)可特異性損害黑質DA能神經元引起帕金森病癥狀，是一種常用的制作PD動物模型藥物。30m歲kg連續(xù)5一7天注射MPTP后，CBL小鼠可出現(xiàn)軀干震顫、豎毛、尾巴過伸及運動減少等PD癥狀。小鼠腦內DA能神經元損傷以凋亡為主，損傷程度與MPTP注射量呈劑量依賴關系。煙酞胺是煙酞胺腺嗓吟二核昔酸即輔酶I(NAD)的前體，在體內與核糖、磷酸、腺嚷吟形成輔酶1參與生物氧化過程和組織新陳代謝。有研究表明，對急性PD小鼠模型應用煙酞胺可保護其黑質

3、細胞，但慢性PD小鼠模型(應用MPTP5天)應用l達國內外均無報道是否減少其黑質細胞凋亡及bax蛋白表驗擬從叢衛(wèi)理.制成的PD小鼠型人手探討細胞凋亡在塑叁病叢制中的作用及煙酞胺在PD治療中的抗凋亡作用，為預防和治療PD提供實驗依據。材料與方法I健康雄性成年C5BL小鼠28只，由中國醫(yī)科大學實驗動物中心提供，體重20土2克。隨機分為4組，每組7只:①正常對照組②煙酞胺組③MPTP組④煙酞胺MPTP組。小鼠采用腹腔注射差分析，p0.05織化

4、學反應越強時判定有統(tǒng)計學意義?；叶戎翟叫。砻髅庖呓M結果1.行為學觀察:MPTP組和MPTP煙酞胺組小鼠每次注射MPTP3分鐘后均出現(xiàn)震顫、爬桿緩慢、運動減少、步寬增加、步長縮短現(xiàn)象，持續(xù)約30分鐘，證明PD小鼠模型制備成功。煙酞胺對PD小鼠行為學指標略有改善趨勢，但無統(tǒng)計學意義。正常對照組和煙酞胺組小鼠無異常行為。2.HE染色:正常對照組和煙酞胺組黑質致密帶區(qū)細胞由大核的多巴胺能神經元和小核的膠質細胞組成。MPTP組可見大量多巴胺能神

5、經元脫失，殘余神經元有散在性固縮、變性，胞漿濃縮、空泡樣變，膠質細胞增生。MPTP煙酞胺組不如MPTP組變化顯著。3.Bax免疫組化染色:正常對照組和煙酞胺組黑質致密帶區(qū)細胞胞漿Bax蛋白低表達。MPTP組Bax蛋白高表達。MPTP煙酞胺組較MPTI〕組Bax蛋白表達明顯降低。4.TUNEL染色:正常對照組和煙酞胺組黑質致密帶區(qū)偶見陽性細胞核。MPTI〕組可見大量棕色陽性細胞核，MPTP煙酞胺組較MPTP組陽性細胞核明顯減少。討論細胞凋