應(yīng)用改進(jìn)的AdEasy系統(tǒng)制備KDR啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)下的雙自殺基因重組腺病毒.pdf

1、建立一種改進(jìn)的AdEasy系統(tǒng)應(yīng)用于復(fù)制缺陷型腺病毒的構(gòu)建,針對傳統(tǒng)的細(xì)菌內(nèi)同源重組法制備腺病毒過程仍較復(fù)雜,成功率低和對實(shí)驗(yàn)室條件要求高等缺點(diǎn),通過先構(gòu)建AdEasier-1細(xì)菌后進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)同源重組來簡化實(shí)驗(yàn)過程,縮短實(shí)驗(yàn)周期,提高成功率,降低對實(shí)驗(yàn)室條件的要求,以利于在更多實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用.并利用這一系統(tǒng)構(gòu)建KDR啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)下的同時(shí)含大腸桿菌胞嘧啶脫氨酶(CD)基因和Ⅰ型單純皰疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因的融合基因重組腺病毒載體,應(yīng)

2、用于大腸癌的抗血管生成治療.利用KDR啟動(dòng)子對腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的靶向作用,驅(qū)動(dòng)CD/5-FC和HSV-TK-GCV兩套自殺基因系統(tǒng)特異性殺傷腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞,為進(jìn)一步開展腫瘤血管的靶向治療研究奠定基礎(chǔ).結(jié)論;1.應(yīng)用改進(jìn)后的AdEasy系統(tǒng)構(gòu)建腺病毒相比于傳統(tǒng)AdEasy系統(tǒng),方法更簡便、成功率更高、實(shí)驗(yàn)周期更短、對實(shí)驗(yàn)室的條件要求低.2.成功構(gòu)建了KDR啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)下的同時(shí)含大腸桿菌胞嘧啶脫氨酶(CD)基因和Ⅰ型單純皰疹病毒胸苷