膽固醇誘導(dǎo)人肝細(xì)胞C反應(yīng)蛋白基因表達(dá)的效應(yīng)及機(jī)理初探.pdf

1、目的：研究膽固醇對人肝細(xì)胞c反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)基因表達(dá)的影響并初步探討其機(jī)制。 方法：分別以濃度為6.25mg/L，12.5mg/L，25.0mg/L，50.0mg/L的膽固醇作用人肝細(xì)胞L-02，采用real-time PCR法檢測細(xì)胞中CRP mRNA轉(zhuǎn)錄情況；Westernblot檢測細(xì)胞內(nèi)CRP基因表達(dá)；免疫比濁法檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中CRP含量，觀察膽固醇對L-02細(xì)胞CRP基因表達(dá)的影

2、響。NF-KB信號通路的阻斷劑吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽(pyrrolidine ditiocarbamate PDTC)干預(yù)膽固醇作用L-02細(xì)胞的反應(yīng)，比較NF-KB信號通路阻斷前后CRP表達(dá)量的變化；用熒光分光光度計(jì)測定膽固醇刺激細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)第二信使鈣離子濃度變化情況，初步探討膽固醇誘導(dǎo)CRP基因表達(dá)的分子機(jī)制。 結(jié)果：膽固醇能誘導(dǎo)人肝細(xì)胞C反應(yīng)蛋白的表達(dá)(P<0.05)，其誘導(dǎo)效應(yīng)隨濃度增加而增強(qiáng)，同時細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度隨膽固