高產(chǎn)酒精酵母的篩選鑒定及生長(zhǎng)和發(fā)酵特性研究.pdf

1、隨著石油資源趨于匱乏和全球環(huán)境污染問題的日益加重,各國紛紛開始開發(fā)新型能源。燃料乙醇是目前為止最理想的石油替代能源,它的生產(chǎn)方法以發(fā)酵為主。菌種的優(yōu)劣對(duì)發(fā)酵效果的影響非常大,能夠篩選出具有優(yōu)良性狀的菌株及對(duì)菌株進(jìn)行改良,對(duì)于降低生產(chǎn)成本,乃至實(shí)現(xiàn)酒精的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn),解決能源危機(jī)都有著重大意義。
　　本文從自然界多種基質(zhì)中采樣,分離得到69株酵母菌,經(jīng)TTC法一級(jí)篩、耐酒精能力二級(jí)篩和產(chǎn)酒精能力三級(jí)篩,最終獲得4株產(chǎn)酒精能力強(qiáng)且

2、能耐受一定酒精濃度的酵母菌,分別編號(hào)為Y-1、Y-2、Y-3和Y-4。根據(jù)《TheYeast:aTaxonomicStudy》(第三版)提供的鑒定方法,進(jìn)行了發(fā)酵糖試驗(yàn)、同化碳源試驗(yàn)、同化氮源試驗(yàn)、無維生素生長(zhǎng)試驗(yàn)、50％葡萄糖-酵母膏生長(zhǎng)試驗(yàn)、37℃生長(zhǎng)試驗(yàn)、放線酮抗性試驗(yàn)等生理生化試驗(yàn),并對(duì)照模式菌株的生理生化特性,鑒定4株酵母菌分別為:Y-1屬于酵母屬(Saccharomyces);Y-2為清酒假絲酵母(Candidasake);

3、Y-3、Y-4均為釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)。本研究分別確定了Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的最適生長(zhǎng)溫度、最適生長(zhǎng)pH值;研究了溫度、pH值、接種量對(duì)Y-1、Y-2、Y-3、Y-4生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明,Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的最適生長(zhǎng)溫度分別為30℃、32℃、30℃、30℃;最適生長(zhǎng)pH值分別為5.5、5.0、4.5、4.5;接種量對(duì)Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的生長(zhǎng)影響顯著;溫度對(duì)Y-1的生

4、長(zhǎng)影響不顯著,對(duì)Y-2、Y-3、Y-4的生長(zhǎng)影響顯著;pH值對(duì)Y-1、Y-3、Y-4的生長(zhǎng)影響不顯著,對(duì)Y-2的生長(zhǎng)影響顯著。用重鉻酸鉀比色法分別確定了Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的最適發(fā)酵溫度、最適發(fā)酵pH值;研究了溫度、pH值、接種量對(duì)Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的發(fā)酵曲線的影響。結(jié)果表明,Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的最適發(fā)酵溫度分別為32℃、32℃、30℃、30℃;最適發(fā)酵pH值分別為5.5、5.0、4.5、4.0;溫度對(duì)

5、Y-1、Y-2、Y-4的發(fā)酵曲線影響顯著,對(duì)Y-3的發(fā)酵曲線影響不顯著;pH值對(duì)Y-1、Y-2、Y-3的發(fā)酵曲線影響顯著,對(duì)Y-4的發(fā)酵曲線影響不顯著;接種量對(duì)Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的發(fā)酵曲線影響不顯著。針對(duì)所獲得的高產(chǎn)酒精酵母野生菌株Y-1、Y-2、Y-3、Y-4,研究它們的耐酒精特性。在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中添加不等量的酒精,測(cè)定Y-1、Y-2、Y-3、Y-4在培養(yǎng)10h后的細(xì)胞死亡率,以此方法得出Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的酒精