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文檔簡介
1、目的:觀察不同濃度羅哌卡因(Ropivacaine,Rop)、丁卡因注入幼兔蛛網(wǎng)膜下腔后對脊髓、脊神經(jīng)的毒性作用,局麻藥致幼兔脊髓、脊神經(jīng)毒性損傷后細胞凋亡現(xiàn)象及其可能機制。 方法:日本大耳白幼兔120只,隨機分為0.25%、O.5%、0.75%三種濃度Rop組(Ro.25組、R0.5組、Ro.75組),0.9%生理鹽水陰性對照組(S組)和2%丁卡因陽性對照組(T組)五個大組,每組24只。五組又分別隨機分為3h組、6h組、7d組
2、三小組,共15個小組,每組8只。所有幼兔行左總頸動脈穿刺置管后監(jiān)測血流動力學(xué)變化。利用鞘內(nèi)給藥技術(shù),于L6,7穿刺后,20秒內(nèi)注入不同濃度Rop,生理鹽水或2%丁卡因各0.2ml。注藥開始同期觀察幼兔的雙后肢運動功能變化。分別于注藥后3h、6h、7d三個時相點處死幼兔,取L5,6段脊髓,應(yīng)用透射電鏡,HE染色觀察神經(jīng)細胞的形態(tài)學(xué)變化。使用TUNEL法鏡下觀察凋亡陽性標記的細胞數(shù),統(tǒng)計凋亡指數(shù)(apoptosisindex,AI)。采用免
3、疫組化法檢測各組三個時相點脊髓神經(jīng)細胞凋亡相關(guān)基因(Bax、Bcb2)的表達情況。 結(jié)果:各組給藥前后的平均動脈壓(MAP)均>60mmHg,各組MAP在給藥前后及組間差異無顯著性(P>0.05)。鞘內(nèi)給藥后,Rop組(R0.25組、R0.5組、R0.75組)兔子雙后肢均出現(xiàn)不同程度的運動功能阻滯,給藥后3h,所有Rop組幼兔的運動功能均已完全恢復(fù)正常。Rop濃度與兔運動阻滯顯效時間和運動阻滯持續(xù)時間成線性關(guān)系,隨著Rop濃度的
4、升高,顯效時間縮短,持續(xù)時間延長。T組則表現(xiàn)為不同程度的雙后肢運動功能障礙,與S組和各個Rop組相比較具有顯著性差異,(P 5、,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張。所有實驗組給藥后3h即出現(xiàn)細胞凋亡和凋亡相關(guān)基因的表達,6h時明顯增多,7d后已明顯下降。R0.25組、R0.5組、R0.75組的AI值與S組比較,差異沒有顯著性(P>0.05):T組AI明顯增高,與S組和各個Rop組比較,具有顯著性差異(P<0.05)。與S組比較,R0.25組、R0.5組、R0.75組bax、bcl-2的陽性細胞光密度值均無明顯差異(P>0.05),T組的陽性細胞光密度值較高,與S組和各個Rop組比較,
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