PCB153對(duì)人B淋巴母細(xì)胞系基因表達(dá)譜的影響.pdf

1、目的:
　　研究2，2'，4，4'，5，5'-六氯聯(lián)苯(2，2'，4，4'，5，5'-hexachlorobiphenyl，PCB153)對(duì)人B淋巴母細(xì)胞基因表達(dá)譜的影響，篩選獲得差異表達(dá)基因，并驗(yàn)證體外篩測(cè)獲得的差異表達(dá)基因在多氯聯(lián)苯高污染地區(qū)人群外周血中的表達(dá)改變。
　　方法:
　　采用0（對(duì)照）和25、100、200μM的PCB153分別處理人B淋巴母細(xì)胞2、24、48 h，收集細(xì)胞后提取總RNA。PCB153處

2、理24 h的RNA樣本用Illumina人HT-12 v4全基因組表達(dá)譜芯片篩測(cè)差異表達(dá)基因，并對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行基因GO(geneontology)分類(lèi)分析。在PCB153處理2、24、48 h樣本中用實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)候選差異表達(dá)基因進(jìn)行驗(yàn)證。
　　采集32例電子垃圾拆解地居民和48例對(duì)照人群外周血樣，提取總RNA，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)候選差異表達(dá)基因的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　芯片結(jié)果顯示，各劑量PCB153

3、處理樣本中分別發(fā)現(xiàn)161、191、1006個(gè)差異表達(dá)基因，三個(gè)劑量組重疊差異表達(dá)基因數(shù)為15個(gè)，其中，上調(diào)基因4個(gè)、下調(diào)基因11個(gè)。選取6個(gè)差異表達(dá)基因用定量PCR進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)2個(gè)上調(diào)基因(CCDC92和TMEM175)及3個(gè)下調(diào)基因(CCL22、STK38L和GZMK)的表達(dá)改變與芯片結(jié)果一致。CCDC92、CCL22、GZMK和TMEM175等可影響多種淋巴細(xì)胞功能，STK38L可作用于細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡等，CCL22和MTDH的

4、異常表達(dá)則與多種癌癥密切相關(guān)。
　　拆解地居民CCL22基因的表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組（為對(duì)照組的66.7％，P=0.016），而GZMK和MTDH基因的表達(dá)水平則顯著高于對(duì)照組(為對(duì)照組的144.9％、163.3％, P=0.048,0.032)。
　　結(jié)論:
　　體外急性染毒PCB153干擾了人B淋巴母細(xì)胞某些重要功能基因的表達(dá)，芯片篩測(cè)和定量PCR驗(yàn)證均表明，PCB153可致人B淋巴母細(xì)胞系CCDC92和TMEM1