Notch1和NF-κB在淋巴母細胞淋巴瘤的表達及其臨床意義.pdf

1、淋巴母細胞淋巴瘤(lymphoblastic lymphoma，LBL)是來源于不成熟前體淋巴細胞的高侵襲性腫瘤，惡性程度高，病變進展快，發(fā)病率約占NHL的4.2％，在兒童NHL中約占30％～40％。根據(jù)免疫表型分為前體T淋巴母細胞淋巴瘤和前體B淋巴母細胞淋巴瘤。其中T細胞型約占80％，B細胞型約占20％。縱隔腫塊、淋巴結(jié)腫大、骨髓和中樞神經(jīng)系統(tǒng)侵犯是其主要的臨床表現(xiàn)。近年來，采用類似治療ALL的強烈化療方案治療兒童青少年LBL取得良好

2、療效，5年無事件生存率(EFS)達70％～90％，但高?；颊吆统扇薒BL的5年生存率仍小于50％，如何確定高?；颊?，早期給予更有效的治療，是進一步提高LBL療效的關(guān)鍵。目前主要根據(jù)誘導治療結(jié)束時未達完全緩解、縱隔病變、巨大腫塊、分期等臨床特點判斷預后和決定下一步治療，但這些臨床特點不能完全反映LBL的生物學特點，因此，近年來尋找LBL新的分子指標，以期更準確地預測LBL患者的預后或提供新的治療靶點成為研究熱點。Notch1屬于Notch

3、跨膜受體家族，Notch家族成員的結(jié)構(gòu)具有高度保守性，在細胞分化、發(fā)育中起著關(guān)鍵作用。最近研究發(fā)現(xiàn)，Notch1不僅對正常細胞分化起重要作用，其參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，并在不同腫瘤中呈現(xiàn)出抑癌或者促癌機制。近年來，越來越多的研究證明了Notch1信號通路的激活對造血系統(tǒng)惡性腫瘤的重要意義，Notch1能促進進入胸腺的淋巴樣前體細胞向T淋巴細胞分化，抑制其向B淋巴細胞分化，在T—LBL中，Notch1的高表達占＞50％的病例，有研究報道其高表

4、達與患者有更好的早期治療反應和長期生存有關(guān)。NF—κB是一種重要的細胞核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，它廣泛參與炎癥反應、免疫應激、細胞增殖、生長分化及凋亡等重要生理過程?，F(xiàn)已證實，NF—κB與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、腫瘤細胞的浸潤轉(zhuǎn)移、抗凋亡及耐藥性的產(chǎn)生密切相關(guān)。最近研究發(fā)現(xiàn)，NF—κB作為Notch1信號通路下游的一個調(diào)控點，參與T—LBL的發(fā)生，抑制NF—κB可阻斷此通路從而抑制腫瘤細胞的生長，提示NF—κB未來有可能作為T—LBL的治療靶點。

5、 本課題應用免疫組化法分別檢測了Notch1和NF—κB在LBL患者腫瘤組織的表達情況，探討LBL患者Notch1和NF—κB的相關(guān)性及其與組織病理分型、臨床特點和預后的關(guān)系，為尋找新的分子標記提供依據(jù)。 研究材料和方法： 1.研究收集了我院2000年10月至2008年8月收治的34例診斷為淋巴母細胞淋巴瘤患者的臨床資料及病理蠟塊，其中男性30例，女性4例；中位年齡11.8歲(2～25歲)，1-18歲29例，18歲以上5

6、例；Ⅰ期1例，Ⅱ期4例，Ⅲ期12例，Ⅳ期17例；T—LBL26例，B—LBL8例。有31例接受了以BFM方案化療為主的聯(lián)合治療，2例接受了CHOAP方案化療，1例放棄治療。抽取5例正常淋巴結(jié)作對照。 2.應用免疫組化法檢測了Notch1和NF—κB在LBL患者腫瘤組織和正常淋巴結(jié)中的表達情況。 3.探討LBL患者Notch1和NF—κB表達的相關(guān)性及其與免疫表型、臨床特點、療效和預后的關(guān)系。用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包進

7、行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。 結(jié)果： 1.Notch1在LBL患者腫瘤組織和正常淋巴結(jié)的表達情況 34例腫瘤組織中Notch1表達情況：陰性(—)9例(26.5％)，弱陽性(+)8例(23.5％)，陽性(++)7例(20.6％)，強陽性(+++)10例(29.4％)。5例正常淋巴結(jié)Notch1表達情況：陰性(—)5例(100.0％)，與腫瘤組織有顯著差異，P=0.035。 2.Notch1表達與LBL患者免疫表型的關(guān)系

8、 26例T—LBL腫瘤組織中Notch1表達情況：陰性(—)5例(19.2％)，弱陽性(+)4例(15.4％)，陽性(++)7例(26.9％)，強陽性(+++)10例(38.5％)。8例B—LBL腫瘤組織中Notch1表達情況：陰性(—)4例(50.0％)，弱陽性(+)4例(50.0％)，無陽性及強陽性表達。Notch1在T—LBL和B—LBL的表達有顯著性差異，P=0.015。 3.Notch1表達與LBL患者臨床特點的

9、關(guān)系 (1)全組Notch1表達的高低與臨床分期有相關(guān)性，分期愈高，Notch1表達的陽性率也愈高(P=0.003)。與LBL患者性別、年齡、B癥狀、巨大包塊、縱隔侵犯、結(jié)外病變、初診時LDH水平、初診WBC計數(shù)均沒有相關(guān)性，P值均大于0.05。 (2)單獨對T—LBL作亞組分析，發(fā)現(xiàn)Notch1表達高低與有無縱隔占位、臨床分期有明顯相關(guān)性，伴有縱隔占位和分期愈高的患者，Notch1表達的陽性率增高，P值分別為0.001

10、、0.007，與患者性別、年齡、B癥狀、巨大包塊、結(jié)外病變、初診時LDH水平、初診WBC計數(shù)均沒有相關(guān)性，P值均大于0.05。 4.Notch1表達與LBL患者近期療效和預后的關(guān)系 (1) Notch1表達強弱與誘導結(jié)束、鞏固結(jié)束療效均無明顯相關(guān)性(P均為0.097).亞組分析中，26例T—LBL患者腫瘤組織的Notch1表達強弱與誘導結(jié)束、鞏固結(jié)束的療效均有相關(guān)性(P均為0.037)，誘導、鞏固達CR或PR者Notch

11、1表達陽性率較高。 (2)分析Notch1表達強弱與LBL患者3年總生存的關(guān)系，Notch1表達陽性3年總生存率為89.5％，陰性為87.5％，兩者無明顯相關(guān)性(P=0.681)。亞組分析中，T—LBL患者Notch1表達陽性組3年總生存率為93.8％，陰性組為75.0％，陽性組較陰性組總生存率高，但無統(tǒng)計學差異(P=0.273)。 5.NF—κB在LBL患者腫瘤組織和正常淋巴結(jié)的表達情況 34例腫瘤組織中NF—

12、κB表達情況：陰性(—)7例(20.6％)，弱陽性(+)5例(14.7％)，陽性(++)13例(38.2％)，強陽性(+++)9例(26.5％)。5例正常淋巴結(jié)NF—κB表達情況：陰性(—)4例(80.0％)，弱陽性(+)1例(20.0％)，與腫瘤組織有顯著差異，P=0.011。 6.NF—κB表達與LBL患者免疫表型的關(guān)系 26例T—LBL腫瘤組織中NF—κB表達情況：陰性(—)4例(15.4％)，弱陽性(+)4例(1

13、5.4％)，陽性(++)11例(42.3％)，強陽性(+++)7例(26.9％)。8例B—LBL腫瘤組織中NF—κB表達情況：陰性(—)3例(37.5％)，弱陽性(+)1例(12.5％)，陽性(++)2例(25.0％)，強陽性(+++)2例(25.0％)。NF—κB在T—LBL和B—LBL的表達無顯著性差異，P=0.577。 7.NF—κB表達與LBL患者臨床特點的關(guān)系 (1) NF—κB表達的高低與LBL患者性別、年齡

14、、B癥狀、巨大包塊、縱隔侵犯、結(jié)外病變、初診時LDH水平均沒有相關(guān)性，P值均大于0.05，與臨床分期有相關(guān)性，分期愈高，NF—κB表達的陽性率也愈高，P=0.018。 (2)單獨對T—LBL作亞組分析，發(fā)現(xiàn)NF—κB表達高低與有無B癥狀、巨大包塊、臨床分期有明顯相關(guān)性，無B癥狀、巨大包塊和分期愈高的患者，NF—κB表達的陽性率增高，P值分別為0.000、0.001、0.001，與患者性別、年齡、縱隔占位、結(jié)外病變、初診時LDH水

15、平均沒有相關(guān)性，P值均大于0.05。 8.NF—κB表達與LBL患者近期療效和預后的關(guān)系 無論在全組患者、T—LBL還是B—LBL中，NF—κB表達強弱與誘導結(jié)束、鞏固結(jié)束療效均無相關(guān)性(P均大于0.05)。全組患者、T—LBL和B—LBL中，NF—κB陽性組3年總生存略高于陰性組，分別為陽性88.9％、95.5％、75.0％，陰性77.8％、75.0％、66.7％，但均無統(tǒng)計學差異(P均大于0.05)。 9.N

16、otch1和NF—κB在LBL腫瘤組織的表達強度的相關(guān)性 Notch1和NF—κB在LBL腫瘤組織表達的強度有明顯相關(guān)性，P=0.017。Notch1和NF—κB表達在T—LBL有明顯相關(guān)性(P=0.018)，在B—LBL無關(guān)(P=0.149)。 結(jié)論： 1.本研究顯示LBL患者Notch1表達水平顯著高于正常淋巴結(jié)，且與免疫表型相關(guān)，在T—LBL患者腫瘤組織高表達，在B—LBL患者腫瘤組織低表達或不表達。

17、 2.Notch1表達的高低表達的高低與LBL患者臨床分期相關(guān)，分期愈高，陽性率也愈高。與T—LBL患者有無縱隔占位、臨床分期相關(guān)，伴有縱隔占位和分期愈高的患者，Notch1表達的陽性率增高。 3.Notch1陽性與T—LBL患者誘導結(jié)束、鞏固結(jié)束獲得CR或PR明顯相關(guān)；Notch1陽性組3年總生存率優(yōu)于陰性組患者，但P值無統(tǒng)計學差異。 4.NF—κB表達在LBL患者的腫瘤組織顯著高于正常淋巴結(jié)，與免疫表型無關(guān)。

18、 5.NF—κB表達的高低與LBL患者臨床分期相關(guān)，分期愈高，陽性率也愈高。在T—LBL中，NF—κB表達高低與有無B癥狀、巨大包塊、臨床分期有明顯相關(guān)性，無B癥狀、無巨大包塊和分期愈高的患者，NF—κB表達的陽性率增高。 6.NF—κB表達強弱與T—LBL、B—LBL誘導結(jié)束、鞏固結(jié)束的療效無相關(guān)性，陽性組3年總生存率略優(yōu)于陰性組患者，但P值無統(tǒng)計學差異。 7.在T—LBL中，Notch1和NF—κB表達的強度有明