低于抑制濃度的抗生素對(duì)銅綠假單胞菌基因表達(dá)的調(diào)節(jié).pdf

1、銅綠假單胞菌(.Pseudomonas aerugionsa)是一種機(jī)會(huì)致病菌，它可以在人群中引起嚴(yán)重的急性和慢性感染，是病人在醫(yī)院期間發(fā)生感染的第三大致病菌。許多抗生素對(duì)其具有一定的治療作用，但銅綠假單胞菌的一個(gè)重要特性是它對(duì)許多抗生素具有很高的內(nèi)在抗藥性，因此，篩選新的抗生素以及新的藥物靶點(diǎn)，是控制銅綠假單胞菌感染的有效途徑。 長(zhǎng)期以來(lái)，由于抗生素所具有的天然的殺菌和抑菌作用，通常被用于治療各種細(xì)菌感染。但是，近期的一些研究

2、表明，低于抑制濃度的抗生素對(duì)許多基因的表達(dá)起著重要的調(diào)節(jié)作用。本研究以銅綠假單胞菌的13個(gè)分泌型毒性因子基因?yàn)閷?duì)象，利用熒光素酶基因操縱子為報(bào)道子，研究了低于抑制濃度的萬(wàn)古霉素、四環(huán)素、阿奇霉素和氨芐青霉素對(duì)基因表達(dá)的影響。 結(jié)果表明，13個(gè)分泌型毒性因子中的五個(gè)：rhlAB、phzA2、lasB、exoY和exoS，其表達(dá)同時(shí)被四種抗生素激活。phzAJ的表達(dá)被除氨芐青霉素之外的其它三種抗生素激活，同時(shí)產(chǎn)物綠膿菌素的產(chǎn)量增加，

3、這與先前關(guān)于低濃度抗生素可以降低細(xì)菌毒性的報(bào)道不同。對(duì)rhlAB基因的研究表明，其表達(dá)在1/4 MIC萬(wàn)古霉素存在下提高了近10倍，產(chǎn)物鼠李糖脂的產(chǎn)量顯著提高，細(xì)胞叢動(dòng)增強(qiáng)。四環(huán)素、阿奇霉素和氨芐青霉素也有類似的結(jié)果。這些結(jié)果表明，作為一種信號(hào)物質(zhì)，低濃度的抗生素對(duì)某些致病因子具有激活作用，從而對(duì)病原菌的致病過(guò)程有著重要而復(fù)雜的影響。 本研究同時(shí)用萬(wàn)古霉素、氨芐青霉素、環(huán)丙沙星、多黏菌素、利福平、紅霉素、卡那霉素、氯霉素和四環(huán)素

4、九種抗生素對(duì)銅綠假單胞菌的隨機(jī)啟動(dòng)子庫(kù)進(jìn)行了檢測(cè)，對(duì)活性發(fā)生明顯改變的啟動(dòng)子，通過(guò)PCR擴(kuò)增、序列測(cè)定及與基因組序列的比對(duì)，確定了受調(diào)節(jié)的基因，同時(shí)檢測(cè)了不同種類抗生素對(duì)這些基因在固體培養(yǎng)基上的調(diào)節(jié)作用。通過(guò)對(duì)一個(gè)由32種化合物組成的小型化合物庫(kù)的初步檢測(cè)，明確了這些化合物對(duì)基因表達(dá)的影響。該方法為從中藥及其他天然成分中研究開發(fā)新型抗致病藥物，提供了一個(gè)可行的技術(shù)平臺(tái)。在用低于抑制濃度的抗生素對(duì)啟動(dòng)子庫(kù)檢測(cè)的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)受調(diào)節(jié)的潛