5-HT2AR-783A-G遺傳多態(tài)性對5-HT2A受體基因轉錄活性的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景：非典型性抗精神病藥物在全球廣泛使用，5-HT2A受體為非典型性抗精神病藥物(APS)的主要作用耙點。5-HT2AR基因調控區(qū)存在-1438A/G多態(tài)性，證明該突變A等位基因可顯著提高5-HT2ARmRNA的轉錄活性，且證明-1438G/G與精神分裂癥患者腦中5-HT2AR受體降低或缺失有關。在5-HT2AR基因的高活性調控區(qū)存在-783A/G突變，但至今，國內外仍未見該基因多態(tài)對5-HT2AR基因轉錄活性影響的報道。
　　

2、 目的：本課題通過分子生物學技術，建立5-HT2AR-783A/G野生型和突變等位基因的TK-PGL4.17重組試驗質粒，在細胞水平研究5-HT2AR-783A/G的突變對5-HT2AR基因轉錄調控的影響。
　　 方法：構建TK-PGL4.17-5-HT2AR-783AA和TK-PGL4.17-5-HT2AR-783GG的螢火蟲熒光素酶報告基因重組試驗質粒，海腎熒光素酶報告基因(PRL-TK)作為內參質粒校正轉染效率，試驗質粒與

3、內參質粒共轉染Hela細胞和入神經母細胞瘤細胞(IMR-32)，轉染48小時后裂解細胞，用雙報告基因熒光檢測試劑盒在自發(fā)光檢測儀上檢測熒光素酶活性，以螢火蟲熒光與海腎熒光的比值反應不同基因型插入片斷的轉錄活性，并比較組間差異。
　　 結果：在Hela細胞系的研究表明5-HT2AR-783A/G基因多態(tài)性顯著影響5-HT2AR基因的轉錄活性，-783A/A野生型對轉錄活性的影響(101.60±39.24)高于-783G/G突變型(

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