養(yǎng)陰潤腸方對大黃造模大鼠水通道蛋白的影響及機制探討.pdf

1、實驗一養(yǎng)陰潤腸方對大黃構(gòu)建慢傳輸便秘模型水通道蛋白AQP3/AQP8的影響
　　目的：觀察養(yǎng)陰潤腸方對大黃造模水通道蛋白的影響，探討朱秉宜養(yǎng)陰潤腸方的通便機制。
　　方法：隨機將32只SD大鼠分為造模組(24只)及正常對照組（6只），正常對照組給予蒸餾水灌胃，造模組采用大黃遞增灌胃法制作慢傳輸型便秘大鼠模型，造模成功后，大鼠隨機分為大黃造模組、莫沙必利組、養(yǎng)陰潤腸方組、自然恢復組。大黃造模組及正常對照組予以一期處死，并采用活

2、性炭灌胃法檢測結(jié)腸傳輸功能、觀察結(jié)腸內(nèi)存留糞便粒數(shù)、糞便含水量，實時熒光定量PCR法檢測水通道蛋白在結(jié)腸上皮表達的變化。其他組繼續(xù)給予相應干預措施干預30 d，之后檢測上述指標。
　　結(jié)果：大黃造模組結(jié)腸內(nèi)存留糞便粒數(shù)較正常組多(P＜0.01)，養(yǎng)陰潤腸方組及莫沙必利組結(jié)腸內(nèi)存留糞便粒數(shù)較大黃造模組少(P＜0.01);大黃造模組較正常組碳末推進率明顯降低(P＜0.01)，與大黃造模組比較，莫沙必利組及養(yǎng)陰潤腸方組碳末推進率明顯升高

3、(P＜0.01)，而自然恢復組與大黃造模組比較，沒有統(tǒng)計學意義(P＞0.05); AQP3在遠端結(jié)腸表達遠高于近端結(jié)腸(F=2.44，p=0.009)，養(yǎng)陰潤腸組，莫沙必利組AQP3表達降低，不能恢復至正常水平，較正常組相比，統(tǒng)計學有差異(養(yǎng)陰潤腸組p=0.020，莫沙必利組p=0.014)。研究還發(fā)現(xiàn)AQP8在結(jié)腸近端表達較為敏感，大黃造模成功后，使用中藥干預和西藥干預AQP8均下降明顯，與模型組相比，統(tǒng)計學有意義(P=0.017，P

4、=0.000)。
　　實驗二洛哌丁胺構(gòu)建大鼠便秘模型對水通道蛋白AQP3/AQP8的影響
　　目的：觀察AQP3，8（水通道蛋白家族）蛋白表達及mRNA表達在洛哌丁胺構(gòu)建大鼠便秘模型中的表達差異，探討其與便秘的關系。
　　方法：SD雄性大鼠30只，隨機分為5組，造模開始時處死一組大鼠，測腸道傳輸功能及結(jié)腸組織的AQP3，8表達水平，作為基準參考線。予以洛哌丁胺3mg/kg/d灌胃，誘導造模，灌胃后第3、7天處死一組大鼠

5、，體外檢測腸道傳輸及AQP3，8蛋白表達，然后予以停藥，停藥后第3、7天再次檢測，分別處死剩余兩組大鼠，檢測相關指標，觀察造模成功后，未予任何干預，便秘大鼠的AQP3，8的表達變化。
　　結(jié)果：大鼠糞便含水量在誘導便秘模型的過程中明顯減少，與正常組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.022)，停藥后7d，糞便內(nèi)的水分并不能自發(fā)恢復至正常(P=0.01).試驗過程中，大鼠結(jié)腸傳輸功能未發(fā)生改變(P=0.971).AQP8遠端表達停藥7天