益氣養(yǎng)陰解毒方對(duì)K562細(xì)胞增殖與凋亡影響.pdf

1、目的：通過益氣養(yǎng)陰解毒方對(duì)K562細(xì)胞增殖與凋亡影響的研究，探討益氣養(yǎng)陰解毒方對(duì)K562細(xì)胞增殖與凋亡的機(jī)制。 方法：本實(shí)驗(yàn)取12只大白兔，隨機(jī)分為4組，①大劑量中藥組：②中劑量中藥組③小劑量中藥組④空白對(duì)照組。各組每日早晚各一次，益氣養(yǎng)陰解毒方藥液灌胃3天后，第4天早上再給藥一次（灌藥前禁食12小時(shí)) ，于最后一次灌藥后1h，心臟取血，組內(nèi)混合，無菌分離血清，獲得三種不同濃度的含藥血清?？瞻讓?duì)照組灌等量生理鹽水，具體操作方法同

2、前，獲得正常兔血清。將經(jīng)過復(fù)蘇后的K562細(xì)胞放入37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液。即加入l0ml含10％小牛血清的RPMI1640 (GBICO)培養(yǎng)液，每2～3天傳代培養(yǎng)，更換細(xì)胞液。實(shí)驗(yàn)時(shí)選取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞。接種于培養(yǎng)板中，然后放入培養(yǎng)箱中，適應(yīng)24h。然后將各組所得血清分別加入對(duì)數(shù)生長期的K562細(xì)胞中，觀察K562細(xì)胞株的生長狀況、K562細(xì)胞形態(tài)的影響、以及益氣養(yǎng)陰解毒含藥血清對(duì)K562細(xì)胞生長曲線的影響、

3、對(duì)K562細(xì)胞MTT值的變化、用流式細(xì)胞儀檢測(cè)K562細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期等指標(biāo)。 結(jié)果：經(jīng)益氣養(yǎng)陰解毒方血清處理后的K562細(xì)胞，均符合細(xì)胞凋亡的特征，含藥血清處理組的K562細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化，末處理組細(xì)胞無形態(tài)學(xué)變化；K562細(xì)胞生長曲線大劑量組、中劑量組與對(duì)照組比較有顯著差異（P〈0.05），小劑量組與對(duì)照組比較無明顯差異（P>0.05）。大劑量組與中劑量組比較亦無明顯差異（P>0.05）。K562細(xì)胞的MTT值，大劑量