益氣養(yǎng)陰活血方對糖尿病大鼠大血管內(nèi)皮素-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:益氣養(yǎng)陰活血方是導(dǎo)師根據(jù)多年臨床實(shí)踐制定的治療糖尿病大血管病變的通用方劑。本實(shí)驗(yàn)通過鏈脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型，應(yīng)用益氣養(yǎng)陰活血方對糖尿病大鼠施加干預(yù)治療，觀察糖尿病大鼠一般行為、體重、血糖、血脂、大血管內(nèi)皮組織形態(tài)變化和大血管內(nèi)皮素-1(ET-1)在不同組別的表達(dá)變化，研究探討本方對糖尿病大鼠大血管病變的防治效果和作用機(jī)制。
　　 方法:選擇清潔級雄性Wistar大鼠60只，體重在180g～220g，普通飼料

2、適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分出15只作為正常組(N)，其他大鼠給予濃度為1％的鏈脲佐菌素(STZ)檸檬酸緩沖液(檸檬酸緩沖液為0.1 mmol/L，pH4.5)按55mg/kg體重一次性腹腔注射，正常組則給予相應(yīng)體積的1％檸檬酸-檸檬酸鈉溶液腹腔注射。72小時(shí)后，斷尾采血，檢測血糖超過16.7mmol/L，飲水量，進(jìn)食量及尿量顯著增多，則造模成功。篩選成模的大鼠，將其隨機(jī)分成模型對照組(M)、益氣養(yǎng)陰活血方組（中藥組，Z）、辛伐他汀組（西藥

3、組，X），每組15只，然后對中藥組及西藥組進(jìn)行灌胃治療，每日一次，Z組按20g/kg·d予益氣養(yǎng)陰活血方濃縮液灌胃，X組給予辛伐他汀片2mg/kg·d灌胃，N組與M組每日給予相應(yīng)中藥濃縮液體積的生理鹽水灌胃，共灌胃12周。于末次灌胃后，禁食禁水12小時(shí)，腹腔注射2％戊巴比妥鈉麻醉，股動(dòng)脈取血，檢測血漿葡萄糖、膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇。無菌操作留取胸主動(dòng)脈置于4％的多聚甲醛溶液中，制作標(biāo)本切片，行HE染色，

4、觀察血管內(nèi)皮組織變化情況，免疫組化測胸主動(dòng)脈內(nèi)皮血管內(nèi)皮素-1的表達(dá)情況，和胸主動(dòng)脈內(nèi)皮組織病理形態(tài)改變。
　　 結(jié)果:
　　 1、一般情況觀察
　　 正常組大鼠在實(shí)驗(yàn)中精神飽滿、行動(dòng)自如、飲食、飲水如常、尿量正常。模型組大鼠則表現(xiàn)精神萎靡，明顯多飲、多食、多尿、消瘦，正如消渴病所述的三多一少的特點(diǎn)。毛色枯黃稀少、倦怠嗜臥、反應(yīng)遲鈍等。有些大鼠出現(xiàn)輕度半身不遂，四肢水腫等癥狀。中藥組大鼠異常表現(xiàn)較模型組為輕，西藥

5、組大鼠在一般情況表現(xiàn)上較之中藥組大鼠為甚。
　　 2、各組大鼠血糖及體重的變化
　　 造模后糖尿病各組大鼠血糖增高，與正常組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);西藥組與模型組之間比較血糖變化不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);中藥組與模型組相比血糖下降，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 與正常組比較，模型組及各治療組體重均有所下降，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01）;與模型組比較，中藥組體重增加，有統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)差異(P＜0.01）;西藥組與模型組之間比較，體重變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05）。
　　 3、各組大鼠血脂的比較
　　 模型組及中藥組的總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)及西藥組的膽固醇(TC)都高于正常組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);兩治療組與模型組相比，血漿總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)均降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);西藥組血漿TC及LDL水平低于中藥組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0

7、1）。
　　 4、各組大鼠大血管內(nèi)皮組織病理形態(tài)學(xué)的觀察
　　 經(jīng)HE染色，正常組細(xì)胞顯示紋理清晰，走形正常，細(xì)胞的胞漿著色均勻，主動(dòng)脈的內(nèi)皮細(xì)胞扁平，內(nèi)膜平坦，中膜處平滑肌細(xì)胞(smooth muscle cell，SMC)與彈力板呈現(xiàn)出平行相間排列。模型組大鼠的主動(dòng)脈壁內(nèi)膜呈局限性增厚，內(nèi)膜局部突起，中膜淺層的平滑肌細(xì)胞可見增生、排列紊亂，彈力板排列不規(guī)則呈波浪狀，少數(shù)出現(xiàn)斷裂、分離。中藥組的組織形態(tài)變化較模型組有明

8、顯減輕，西藥組較模型組變化則不明顯。
　　 5、糖尿病大鼠大血管內(nèi)皮素-1的表達(dá)。
　　 與正常組比較，模型組及兩治療組大鼠胸主動(dòng)脈的血管內(nèi)皮素-1表達(dá)高于正常組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。中藥組及西藥組與模型組比較，ET-1的表達(dá)有所減少，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。兩個(gè)治療組間比較，中藥組較西藥組的ET-1表達(dá)減少，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1、益氣養(yǎng)陰活血方可