金黃色葡萄球菌刺激巨噬細胞活化JNK和Th1-Th2型細胞因子分泌的影響.pdf

1、背景：哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD),兩者都是由氣道狹窄引起氣道炎性疾病,并且其發(fā)病率在世界各地均呈上升趨勢,造成了嚴重的醫(yī)療負擔(dān)。目前認為細菌感染不僅導(dǎo)致氣道疾病的急性加劇,更是參與氣道慢性炎性疾病的發(fā)生發(fā)展。特別是近年來發(fā)現(xiàn)金黃色葡萄球菌與哮喘,COPD的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。人體固有免疫系統(tǒng)中巨噬細胞作為機體防御病原菌的第一道防線,通過其特定的免疫受體識別系統(tǒng)(PPR)參與免疫應(yīng)答。當(dāng)PAMP和TLR相互作用后,通過它們的Toll

2、/IL-1R結(jié)構(gòu)域,招募接頭蛋白MyD88后進而活化NF-κB和MAPK,從而導(dǎo)致各種細胞因子,趨化因子,粘附分子及其他促炎分子的產(chǎn)生,繼而有助于白細胞募集和細菌清除。研究發(fā)現(xiàn)TLR2能夠識別革蘭氏陽性菌(如金黃色葡萄球菌)以及革蘭氏陽性細菌成分,如脂磷壁酸(LTA)、肽聚糖(PGN)。當(dāng)金黃色葡萄球菌刺激TLR2后能夠激活促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族成員-ERK、p38和Jun氨基末端激酶(JNK)。JNK/MAPK活化后能夠

3、誘導(dǎo)多種基因的表達參與調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。
　　目的：探討金黃色葡萄球菌感染刺激小鼠巨噬細胞系RAW264.7細胞對JNK/MAPK信號通路分子的活化及其對Th1/Th2型細胞因子表達的影響。
　　方法：小鼠單核巨噬細胞系RAW264.7細胞進行體外培養(yǎng)后,以感染復(fù)數(shù)(MOI)值為10(金葡菌:細胞=10:1)感染刺激RAW264.7細胞,設(shè)置時間點分別為0.5、1.0、1.5、2.0h。Western blot檢測金葡菌刺激后R

4、AW264.7細胞 JNK磷酸化水平,ELISA法檢測各時間點RAW264.7細胞上清中白介素-5(IL-5)和干擾素-γ(IFN-γ)的表達水平。
　　結(jié)果：金黃色葡萄球菌感染刺激RAW264.7細胞后JNK磷酸化水平顯著升高,在0.5h最明顯(P<0.01);細胞上清中IFN-γ水平在金葡菌刺激后0.5、1.0h顯著升高(P<0.01),而在1.5、2.0h逐漸恢復(fù)到正常水平(P>0.05);IL-5水平在金葡菌刺激后1h時開