CASK在癲癇患者和點燃鼠腦組織中的表達(dá)及其可能機(jī)制.pdf

1、目的:
　　探索CASK在難治性顳葉癲癇患者和癲癇大鼠模型中腦組織內(nèi)（海馬和皮質(zhì)）的表達(dá)及其參與癲癇發(fā)作的可能機(jī)制。
　　方法:
　　按隨機(jī)化原則從課題組建立的難治性癲癇患者術(shù)后腦組織庫中抽取30例難治性癲癇患者腦組織，分別用免疫熒光，免疫組化和western blotting檢測CASK的表達(dá)，并與年齡、性別相似的非癲癇患者腦組織進(jìn)行比較，完成后選擇56只健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為8組（每組n=8）:對照組和實驗組

2、——點燃后隨機(jī)分為6h，1d，3d，7d，14d，30d，60d這7組，再次通過免疫熒光，免疫組化和westernblotting驗證CASK在腦內(nèi)的表達(dá);隨后采用慢病毒抑制大鼠腦內(nèi)CASK的表達(dá)，點燃這些大鼠并在點燃1h內(nèi)觀察干預(yù)前后大鼠行為學(xué)的改變和進(jìn)一步運用western blotting驗證干預(yù)前后CASK復(fù)合物下游分子NMDAR2b在點燃后的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　人和動物腦組織標(biāo)本的免疫熒光結(jié)果均顯示CASK僅在

3、神經(jīng)元中表達(dá)，而在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中不表達(dá)，且免疫組化結(jié)果顯示CASK在實驗組的陽性表達(dá)明顯高于對照組。在人的腦組織樣本中，Westernblotting檢測發(fā)現(xiàn)CASK蛋白在顳葉癲癇患者皮質(zhì)中的表達(dá)明顯高于對照組(p＜0.05)。在實驗鼠的腦組織中，CASK在海馬的表達(dá)表現(xiàn)為點燃后1d降至最低，后逐漸增高直至60d(p＜0.05，除外點燃后14天);CASK在皮質(zhì)中的表達(dá)表現(xiàn)為點燃后6h開始增高，且維持高水平直至60d(p＜0.05)。在