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文檔簡介
1、目的:本研究主要是通過觀察芒果三芪肺纖方(芒果苷、黃芪多糖、三七總皂苷)對博萊霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化的治療作用并探討其作用機制,尋求防止肺纖維有效的藥物。
方法:(1)芒果三芪肺纖方對博萊霉素致小鼠肺纖維化治療作用研究:通過鼻腔一次性滴入6mg/kg博萊霉素復(fù)制小鼠肺纖維化模型。18-22g昆明種雄性小鼠隨機分為A空白組、B模型組、C陽性組、D芒果三芪肺纖方組。各給藥組于造模后第14d開始給予相應(yīng)的干預(yù),干預(yù)14天后處死各組小
2、鼠。采用試劑盒測定肺組織勻漿中的羥脯氨酸(HYP)含量以及丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活力;HE染色觀察肺組織病理切片和 Masson染色觀察膠原纖維分布;采用 ELISA測白介素-1β(IL-1β)含量。
(2)芒果三芪肺纖方及其拆方對博萊霉素致小鼠肺纖維化治療作用研究:造模同上。18-22g昆明種雄性小鼠隨機分為a空白組、b模型組、c陽性組、d芒果三芪肺纖方組、e益氣化痰方,f益氣活血方、g活血化痰方。各
3、給藥組于造模后第14d開始給予相應(yīng)的干預(yù),干預(yù)14天后處死各組小鼠。測定指標(biāo)同上。
(3)芒果三芪肺纖方對博萊霉素致小鼠肺纖維化治療作用機制研究:造模、給藥、動物分組同第一部分。采用HE染色觀察肺組織病理切片和Masson染色觀察膠原纖維分布;采用試劑盒測定肺組織勻漿中的羥脯氨酸(HYP)含量;免疫組化法測定TNF-ɑ的表達和實時熒光定量PCR法檢測TNF-αmRNA基因表達。
結(jié)果:(1)芒果三芪肺纖方組小鼠毛色、
4、體重等一般情況優(yōu)于模型組,陽性組、芒果三芪肺纖方組小鼠體重較模型組顯著增加(P<0.01-0.05);HE和Masson染色觀察顯示芒果三芪肺纖方組可以減輕肺泡炎損傷和抑制肺纖維化病變程度(P<0.01);而且能顯著性的降低HYP的表達水平(P<0.01)。芒果三芪肺纖方組都能夠調(diào)節(jié)肺纖維化小鼠體內(nèi)的自由基代謝,顯著提高模型小鼠體內(nèi)總SOD活力(P<0.01),并顯著性的降低MDA含量的表達(P<0.01),ELISA法檢測IL-β的含
5、量表達顯著性的降低(P<0.01)。
(2)芒果三芪肺纖方組、益氣化痰方組、益氣活血方組、活血化痰方組小鼠體重較模型組均顯著性增加(P<0.01-0.05),芒果三芪肺纖方組和益氣化痰方組效果最好;HE和Masson染色觀察顯示各給藥組可以減輕肺泡炎損傷和抑制肺纖維化病變程度(P<0.01),;而且能顯著性的降低HYP的表達(P<0.01)。各給藥組都能夠調(diào)節(jié)肺纖維化小鼠體內(nèi)的自由基代謝,顯著性地提高小鼠體內(nèi)總SOD活力(P<
6、0.01),并顯著性的降低MDA含量的表達(P<0.01),ELISA法檢測表明各給藥組IL-β的含量表達顯著性的降低(P<0.01)。
(3)HE和Masson染色觀察顯示芒果三芪肺纖方組可以明顯的減輕肺泡炎損傷和肺纖維化程度(P<0.01);免疫組化的結(jié)果顯示芒果三芪肺纖方組顯著降低TNF-ɑ的表達(P<0.01);RT-PCR的結(jié)果顯示芒果三芪肺纖方組顯著降低TNF-ɑ mRNA的表達(P<0.01)。
結(jié)論:
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