基于金納米顆粒的目視比色凝血酶檢測和特定序列DNA分析.pdf

1、目視比色法是根據(jù)反應(yīng)的顏色變化來確定物質(zhì)含量的一種簡單分析方法。此方法具有易于觀測、儀器設(shè)備簡單、操作簡便的特點。金納米顆粒性質(zhì)穩(wěn)定、易于制備,親和力強、生物相容性好,是一種理想的標(biāo)記分子,已廣泛應(yīng)用于生物分析領(lǐng)域。論文以金納米顆粒為標(biāo)記物,采用目視比色法,發(fā)展了的凝血酶比色分析和特定序列DNA比色分析方法。整個論文由以下三個部分組成:
　　第一章:綜述——金納米顆粒的研究進(jìn)展及應(yīng)用
　　本章綜述了金納米顆粒的性質(zhì)、制備技術(shù)

2、以及金納米顆粒在生物分析領(lǐng)域中的應(yīng)用。
　　第二章:基于金納米顆粒的凝血酶比色分析法
　　本章建立了基于纖維蛋白原修飾的金納米顆粒的凝血酶比色分析法。該方法借助于人體凝血過程中凝血酶-纖維蛋白原作用機制。將凝血酶和纖維蛋白原修飾的金納米顆粒同時加入固定有纖維蛋白原的96微孔板,凝血酶裂解纖維蛋白原形成網(wǎng)狀彼此連接的纖維蛋白,將金納米顆粒固定于微孔板表面。結(jié)合金染色方法,可以將凝血酶檢測信號轉(zhuǎn)換為裸眼可觀測的實驗信號。在優(yōu)化的

3、實驗條件下,對凝血酶的最低檢測限為3.2fM。由于凝血酶與纖維蛋白原之間特異性的識別作用,此檢測分析法顯示了很好的專一性,還有望應(yīng)用于復(fù)雜成分中凝血酶的含量測定。
　　第三章:基于金納米顆粒的特定序列DNA比色分析法
　　本章建立了基于金納米顆粒和發(fā)夾DNA構(gòu)型改變的特定序列DNA目視比色分析法。發(fā)夾DNA兩端分別標(biāo)記氨基和生物素,通過氨基固定于96微孔板表面。當(dāng)未加入目標(biāo)DNA時,發(fā)夾DNA成閉合狀態(tài),其空間結(jié)構(gòu)阻止了鏈霉